Qiagen, 217261, Kit QIAcube HT avanzado miRNeasy 96 (5)

Para 480 preparaciones: placas RNeasy 96, agua libre de ARNasa, tampones

Características

- Aislamiento de miRNA sin fenol a partir de muestras de suero y plasma humano, de ratón o de rata
- Procesamiento automatizado simple y confiable para ahorrar tiempo y costos
- miRNA de alta calidad listo para usar en cualquier aplicación posterior
- Rendimientos de miRNA consistentes a partir de pequeñas cantidades de material de partida

Detalles del producto

El kit miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT está diseñado para la purificación automatizada de alto rendimiento de ARN total acelular (principalmente miARN y otros ARN pequeños) a partir de pequeños volúmenes de suero y plasma en el QIAcube HT. Mediante la probada tecnología de membrana de sílice RNeasy en un práctico formato de 96 pocillos, se eliminan contaminantes e inhibidores para obtener ARN de alta calidad, listo para su posterior análisis.

Actuación

El kit miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT es la versión de rendimiento medio a alto del kit miRNeasy Serum/Plasma Advanced y proporciona el mismo rendimiento y calidad de ARN utilizando tecnología de aislamiento sin fenol (consulte las figuras Rendimiento comparable con el kit manual que utiliza volúmenes iguales) y Rendimiento comparable con el kit manual que utiliza cantidades iguales de ARN). El kit miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT aísla eficazmente el ARN total, incluido el miARN, de muestras de suero y plasma humano y animal de 50 µl a 200 µl (procesamiento de diferentes cantidades de plasma). El kit es compatible con la mayoría de los dispositivos de recolección de sangre (consulte la figura Compatibilidad con diferentes tubos de recolección de sangre). El protocolo sin fenol utiliza tecnología de columna de centrifugación fácil de automatizar en formato de 96 pocillos y minimiza el tiempo de manipulación. A diferencia de los kits de otros proveedores, el kit miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT combina facilidad de uso y un protocolo sin fenol sin comprometer la calidad o el rendimiento del ARN (consulte la figura Rendimientos y rendimiento comparables o mejores).

Principio

El kit miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT permite la purificación automatizada de ARN total libre de células, principalmente miARN y otros ARN pequeños, a partir de 20-200 µl de plasma humano o animal mediante el instrumento QIAcube HT. Las propiedades de unión selectiva de una membrana de sílice se combinan con un formato de 96 pocillos de alto rendimiento para el procesamiento simultáneo y totalmente automatizado de 24-96 muestras en el instrumento QIAcube HT. El kit combina la lisis de muestras con guanidina, un paso de eliminación de inhibidores y la purificación de ARN total mediante membrana de sílice.

El sistema ofrece dos protocolos: uno de transferencia para trasladar el lisado desde la etapa de precipitación de proteínas a la placa RNeasy 96 y otro de aislamiento de ARN libre de células para extraer el miARN del lisado. Estos procedimientos producen ARN de alta calidad con un excelente rendimiento en aplicaciones posteriores.

Procedimiento

La lisis se realiza manualmente en condiciones altamente desnaturalizantes con tiocianato de guanidina para inactivar inmediatamente las ARNasas y garantizar la purificación del ARN intacto (consulte la figura del procedimiento del kit miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT).

Tras iniciar la serie, se añade isopropanol al sobrenadante que contiene ARN para proporcionar las condiciones de unión adecuadas para todas las moléculas de ARN a partir de aproximadamente 18 nucleótidos (nt). Posteriormente, las muestras se transfieren (manual o automatizadamente) a los pocillos de la placa RNeasy 96. El ARN total se une y los contaminantes se eliminan eficazmente. El ARN de alta calidad se eluye en agua sin ARNasas, listo para su uso en cualquier aplicación posterior.

Aplicaciones

- Descubrimiento de biomarcadores
- Perfilado de expresiones
- Secuenciación de próxima generación
- RT-PCR cuantitativa en tiempo real
- Análisis de microarrays

El kit miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT aísla el ARN libre total y exosomal del plasma o suero. Sus aplicaciones posteriores incluyen: