Qiagen, 221417, kit de mensajería unificada QIAprep y ARN viral (2400)

Para reacciones de 2400 x 20 µl: 4 x 1,2 ml de tampón de preparación UM de ARN viral, 8 x 1,5 ml de mezcla maestra de ARN viral, 4 x 4 x 1,2 ml de plantilla de IC de ARN + ensayo, 4 x 0,6 ml de ensayo de IC de muestreo humano, 4 x 1 ml de QN ROX, 8 x 1,9 ml de agua sin ARNasa

Características

- Preparación de muestras y detección de virus basada en PCR en tiempo real integradas en un único kit
- Tiempo para obtener el resultado en menos de 1 hora
- Flujo de trabajo integral basado en líquidos para una automatización completa de los manipuladores de líquidos
- Compatibilidad con cualquier ensayo y ciclador de PCR en tiempo real
- Capacidad de PCR de 4 plexos (RT) para la detección de hasta 4 objetivos, incluidos objetivos virales y/o controles
- Incluye dos controles (inhibición y muestreo) para una interpretación confiable de los resultados.
- Procedimiento de inicio en caliente de dos fases y RT estable incluidos en la mezcla maestra para estabilidad y especificidad

Detalles del producto

El kit QIAprep& Viral RNA UM es un innovador enfoque líquido para la epidemiología del ARN viral. Está optimizado para la preparación ultrarrápida de muestras y la detección sensible mediante PCR en tiempo real de virus de ARN con envoltura, como los coronavirus, a partir de muestras humanas (hisopados nasales, orofaríngeos y nasofaríngeos) recolectadas en medios de transporte sin fijación como UTM, VTM, PBS, NaCl al 0,9 %, Virocult y eSwab. El kit también es compatible con muestras de saliva pura y gárgaras. La simplificación de los pasos del flujo de trabajo acelera el tiempo de respuesta y aumenta la frecuencia de las pruebas, a la vez que reduce el uso de plástico, el coste y el tiempo de intervención. El método se integra perfectamente en flujos de trabajo automatizados con equipos de laboratorio estándar, independientemente de la necesidad de rendimiento. El kit QIAprep& Viral RNA QIAsymphony puede utilizarse para la preparación automatizada de muestras y la configuración de ensayos en el QIAsymphony SP/AS. El kit QIAprep& Viral RNA QIAsymphony requiere la instalación de un protocolo personalizado disponible en los Servicios QIAGEN.

El kit QIAprep& Viral RNA UM se puede utilizar junto con el kit de ensayo SARS-CoV-2 N1+N2.

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Para los laboratorios que necesitan rastrear mutaciones relevantes del virus, se han diseñado ensayos de genotipado qPCR basados ​​en LNA, probados en laboratorio, para detectar las variantes de preocupación (VOC). La especificidad y sensibilidad del ensayo se han verificado con el kit QIAprep& Viral RNA UM. Consulte los ensayos aquí.

Actuación

El flujo de trabajo integral basado en líquidos del kit QIAprep& Viral RNA UM dura menos de una hora. Incluye un paso opcional de tratamiento térmico y solo tres pasos de pipeteo, realizados directamente en el recipiente de reacción de PCR. Este procedimiento simplificado reduce el número de pasos de manipulación y el uso de plástico, y puede automatizarse completamente mediante manipuladores de líquidos. Su simplicidad y velocidad permiten un rendimiento de hasta 2600 muestras por termociclador de PCR en tiempo real en un turno de ocho horas (es decir, aproximadamente siete ciclos de 384 muestras cada uno).

El kit es compatible con muestras recolectadas en medios de transporte sin fijación, como UTM, VTM, PBS, NaCl al 0,9 %, Virocult y eSwab (véase la figura "Resultados consistentes con seis medios de transporte diferentes"). También es compatible con muestras de saliva pura y gárgaras (véanse las figuras "Comparación del rendimiento del kit QIAprep& Viral RNA UM entre muestras de saliva y gárgaras" y "Comparación del protocolo del rendimiento del kit QIAprep& Viral RNA UM con muestras de saliva").

Gracias a la química optimizada, el nuevo kit QIAprep& Viral RNA UM ofrece un rendimiento comparable a los flujos de trabajo de qPCR estándar que utilizan el estándar de oro para la extracción de muestras (consulte la figura "Evaluación confiable del límite de detección (LOD) de partículas virales").

Principio

Ensayo: Objetivo(s)
Control de inhibición: IVT sintético
Control de muestreo: genes humanos B2M y RNasa P
Colorante de referencia pasivo: -
Su ensayo de ARN viral: definido por el usuario

El kit QIAprep& Viral RNA UM combina la preparación de muestras líquidas, que se completa en tan solo dos minutos, con la detección por RT-PCR en tiempo real en un flujo de trabajo optimizado. Los usuarios pueden automatizar este método con equipos de laboratorio estándar para cualquier necesidad de rendimiento, ensayo y reacción, desde pruebas individuales hasta multiplex.

El kit es compatible con sondas de doble marcado, como las sondas TaqMan®, para la detección mediante RT-PCR multiplex de un solo paso de una o más dianas (hasta 4 ensayos en total, incluyendo los controles internos). El kit se ha optimizado para su uso con la mayoría de los termocicladores en tiempo real. Un novedoso procedimiento de arranque en caliente de dos fases garantiza una alta especificidad y sensibilidad en la RT-PCR en tiempo real. Para garantizar una alta seguridad durante la detección del virus, cada kit contiene reactivos para la detección simultánea de dianas definidas por el usuario y dos controles internos para una interpretación fiable de los resultados.

El primero es el control de inhibición, que consiste en un ARN sintético con una secuencia única y artificial, y su ensayo de detección, que puede utilizarse opcionalmente para monitorizar la amplificación exitosa. El control de inhibición de ARN está diseñado para informar fallos del instrumento o de la química, errores en la configuración del ensayo y la presencia de inhibidores. El segundo control es un control de muestreo, un ensayo dirigido a dos transcritos humanos, que puede utilizarse opcionalmente para confirmar que el tubo de muestra primario contiene material humano y que el ARN no se ha degradado. En conjunto, esto permite una correcta interpretación de los resultados negativos de detección.

*En total, hasta 4 ensayos o objetivos, incluidos los controles internos y excluido el colorante de referencia.

Procedimiento

El innovador QIAprep& ofrece un flujo de trabajo rápido y sencillo de 3 pasos para la detección de virus: se toma una alícuota de una muestra primaria (hisopado nasofaríngeo, orofaríngeo o nasal) en un medio de transporte como material de partida. Esta muestra puede someterse a un tratamiento térmico opcional antes de añadirse a un tampón de preparación de muestras optimizado directamente en el recipiente de PCR, lo que permite la preparación del ARN viral molde sin degradación en dos minutos. Para muestras de saliva y gárgaras, hemos desarrollado protocolos específicos que incluyen un breve pretratamiento térmico. A continuación, se combina con una mezcla de reacción RT-qPCR en el mismo tubo o pocillo para una amplificación rápida en cualquier termociclador y con cualquier ensayo. El resultado se interpreta finalmente, entregando los resultados de la prueba en menos de una hora de principio a fin, incluyendo la incubación y el tiempo de manipulación (véase la figura "Un innovador flujo de trabajo de 3 pasos basado en líquido").

Aplicaciones

El kit QIAprep& Viral RNA UM simplifica y acelera la detección basada en PCR en tiempo real de virus de ARN con envoltura, como el coronavirus SARS-CoV-2, a partir de muestras humanas con fines de investigación epidemiológica.