Qiagen, 249900, ensayo de cebadores QuantiTect (200)

Para reacciones de 200 x 50 µl o 400 x 25 µl: 10x QuantiTect Primer Assay (liofilizado) suministrado en un solo tubo

Características

- Resultados garantizados con cebadores prediseñados para todo el genoma
- Eficiencias de PCR de ~100 % para una cuantificación relativa confiable
- Alta sensibilidad y especificidad
- Cuantificación precisa en un amplio rango lineal
- Ahorro de tiempo y costes con la detección SYBR Green

Detalles del producto

Los ensayos de cebadores QuantiTect son conjuntos de cebadores genómicos validados bioinformáticamente para su uso en RT-PCR en tiempo real basada en SYBR Green en cualquier ciclador. Están disponibles para todos los genes de humanos, ratas, ratones y muchas otras especies. Cada ensayo para un gen específico se suministra como una mezcla liofilizada de cebadores directos e inversos que se puede reconstituir fácilmente para obtener una solución de ensayo 10x (los componentes de reacción para RT-PCR en tiempo real deben pedirse por separado). Al combinarse con los kits QuantiFast, QuantiTect, Rotor-Gene o FastLane para la detección de SYBR Green, los ensayos de cebadores QuantiTect garantizan resultados altamente específicos y sensibles en RT-PCR en tiempo real, comparables a la detección con sonda.

Actuación

Los ensayos de cebadores QuantiTect permiten la cuantificación reproducible de transcripciones de ARN en un rango de cantidades de plantilla (véase la parte [A] de la figura "RT-PCR en tiempo real reproducible"). Se garantiza una cuantificación precisa cuando los ensayos se realizan con los kits QuantiFast SYBR Green u otros kits SYBR Green de QIAGEN. Los kits evitan la formación de artefactos de PCR (véase la parte [B] de la figura "RT-PCR en tiempo real reproducible").

Al utilizar los kits QuantiFast, QuantiTect, Rotor-Gene o FastLane SYBR Green (mezclas maestras para RT-PCR de dos o un paso), los ensayos pueden incluso arrojar valores de CT más bajos que los ensayos basados ​​en sondas (véase la figura "Sensibilidad superior en RT-PCR en tiempo real"). Esto se debe a la alta especificidad de PCR de los kits y a la unión múltiple del colorante SYBR Green a cada producto de PCR. Es posible una cuantificación altamente sensible incluso con transcripciones de baja abundancia.

Procedimiento

qRT-PCR de dos pasos: qRT-PCR de un paso
Kit de PCR QuantiFast SYBR Green: Kit de RT-PCR QuantiFast SYBR Green
Kit de PCR Rotor-Gene SYBR Green: Kit de RT-PCR Rotor-Gene SYBR Green
Kit de PCR QuantiTect SYBR Green: Kit de RT-PCR QuantiTect SYBR Green

Cada ensayo de cebadores QuantiTect se suministra como una mezcla liofilizada de cebadores directos e inversos para un gen específico. Los cebadores se reconstituyen en TE, pH 8,0, para obtener una solución de cebadores 10x, que se añade a la mezcla maestra suministrada con un kit QuantiFast, QuantiTect, Rotor-Gene o FastLane para la detección de SYBR Green. La mezcla maestra con cebadores se alicuota en tubos o pocillos de PCR y, a continuación, se añaden las muestras molde individuales.

Los ensayos de cebadores QuantiTect proporcionan resultados garantizados en el análisis de expresión genética cuando se utilizan en combinación con uno de los siguientes kits que se muestran en la tabla.

Los ensayos de cebadores QuantiTect están diseñados para detectar ARN únicamente cuando sea posible. Para ensayos donde la detección de ADN genómico es inevitable, se puede preparar ADNc utilizando el kit de transcripción inversa QuantiTect o el kit de ADNc celular FastLane. Ambos kits permiten la síntesis de ADNc con eliminación integrada de la contaminación del ADN genómico.

Nombramiento

Cada ensayo de cebadores QuantiTect disponible para un gen específico recibe un número que aparece en el nombre del producto después del símbolo del gen. Lea más en las preguntas frecuentes de GeneGlobe.

Aplicaciones

- Validación de la supresión génica mediada por ARNi
- Validación de resultados de microarrays
- Cribado de alto rendimiento

Los ensayos de cebadores QuantiTect se utilizan para el análisis de la expresión génica mediante qRT-PCR de uno y dos pasos con detección SYBR Green. Son ideales para aplicaciones como: