Qiagen, 249955, Paneles de enfoque de PCR de sonda LNA QuantiNova

Placa lista para usar con ensayos centrados en áreas o vías de investigación para dianas de ARNm, en formato de 96 o 384 pocillos para cualquier ciclador. Pedido mínimo de 1 placa; descuento al pedir 6 o más copias de la misma placa: 25 % de descuento para 6-11 placas; 40 % de descuento para 12-23 placas; 55 % de descuento para más de 24 placas.
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Características

- Paneles diseñados por expertos que se dirigen a los genes más relevantes centrados en vías o enfermedades
- Perfilado simultáneo de 84 genes relacionados
- Sensibilidad y especificidad excepcionales utilizando cebadores cortos mejorados con LNA y sondas de hidrólisis marcadas con FAM
- Estabilidad para la configuración de temperatura ambiente que permite la automatización
- Resultados robustos y reproducibles en menos de 2 horas utilizando el kit PCR QuantiNova Probe

Detalles del producto

Los paneles de PCR con sonda LNA de QuantiNova permiten un análisis rápido y fiable de la expresión génica en más de 150 vías, tanto en humanos como en ratones y ratas, mediante qPCR basada en sondas de hidrólisis. La mejora de LNA nos permite diseñar cebadores más cortos con una temperatura de transferencia (Tm) óptima, lo que permite un posicionamiento flexible en la diana para una discriminación de secuencia óptima. Una validación exhaustiva del diseño garantiza un rendimiento superior y una detección robusta. Optimizado con la química de QuantiNova, el sencillo flujo de trabajo se completa en menos de 2 horas y es lo suficientemente robusto como para permitir la configuración a temperatura ambiente, la automatización y la ejecución diferida. También ofrecemos paneles flexibles, semipersonalizables a partir de los ensayos de nuestros paneles de enfoque, así como paneles personalizados con su elección de ensayos prediseñados o personalizados.

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Durante el lanzamiento anticipado, solo estarán disponibles los paneles de enfoque para humanos y ratas. Los paneles de enfoque para ratones se lanzarán próximamente.

Actuación

Mejora experta de LNA para un rendimiento superior de qPCR

Los ensayos de los paneles QuantiNova LNA Probe PCR Focus se han desarrollado utilizando estrictos criterios de diseño y algoritmos validados en laboratorio. Veinte años de experiencia en diseño de LNA nos han permitido optimizar nuestro sofisticado algoritmo, que incorpora más de 50 parámetros diferentes para garantizar el ensayo más óptimo para la detección exitosa de la diana. Cada conjunto de cebador-sonda ofrece la máxima especificidad y eficiencia para obtener resultados fiables y precisos. La mejora de LNA permite la normalización de la Tm en todo el panel y proporciona a los cebadores y sondas una mayor afinidad de unión, lo que aumenta drásticamente la sensibilidad y especificidad del ensayo.

La mayor sensibilidad garantiza una excelente eficiencia de amplificación de hasta una molécula de ARN, lo que facilita la detección de dianas de baja abundancia, como lncRNA, a partir de menos material de partida (véase la figura). Los ensayos de PCR con sonda QuantiNova LNA proporcionan una cuantificación precisa, sensible y lineal de dianas en un amplio rango dinámico y la figura. Los ensayos de PCR con sonda QuantiNova LNA permiten la detección de ARNm tanto de alta como de baja expresión. La mayor especificidad, gracias a la inteligente colocación de LNA, proporciona una alta relación señal-ruido, lo que permite la discriminación de secuencias que difieren en un solo nucleótido y elimina la amplificación inespecífica y la formación de dímeros de cebadores.

La alta afinidad de unión de las bases de LNA aumenta la flexibilidad de la colocación de cebadores y sondas en el transcrito, lo que nos permite usar un posicionamiento inteligente para diseñar ensayos para dianas que de otro modo serían difíciles de analizar. Esto proporciona una cuantificación robusta y fiable, incluso para dianas ricas en AU, transcripciones de baja abundancia, dianas con alta estructura secundaria y muestras de alta complejidad.

Principio

Cantidad de placas solicitadas: Descuento (%)
1–5: 0
6–11: 25
12–23: 40
24+: 55

- Normalización de datos
- Detección de contaminación del ADN genómico
- Calidad de la muestra de ARN
- Rendimiento general de PCR

qPCR basada en sonda de hidrólisis robusta y de alto rendimiento

Los paneles PCR Focus QuantiNova LNA Probe utilizan detección basada en sonda de hidrólisis marcada con FAM, altamente sensible y robusta, ya que solo detecta el producto de PCR deseado. La detección basada en sonda aún requiere una alta especificidad de PCR para evitar artefactos de amplificación, como productos de PCR inespecíficos y dímeros de cebadores, que pueden competir por los componentes de la reacción y comprometer el rendimiento. Sin embargo, ya hemos optimizado el sistema PCR QuantiNova LNA Probe para eliminar la amplificación inespecífica y ofrecerle una detección precisa y sensible en todo momento.

La cobertura más completa y específica

Los paneles QuantiNova LNA Probe PCR Focus incluyen los ensayos necesarios para un panel exhaustivamente investigado de genes relevantes para vías o enfermedades. Los ensayos prediseñados se han diseñado utilizando nuestro algoritmo patentado para proporcionar el análisis más sensible, preciso y eficaz. La mayoría de los ensayos abarcan intrones siempre que sea posible y detectan únicamente ARN. Los ensayos que no abarcan un intrón se designan como tales, y si hay un exón en la diana, las señales no deseadas se pueden eliminar fácilmente utilizando el kit de transcripción inversa QuantiNova con el paso integrado de eliminación de ADNg.

Diseño y controles flexibles

Los paneles de enfoque de PCR QuantiNova LNA Probe están disponibles en formatos de placa de 96 pocillos, placa de 384 pocillos y disco de 100 pocillos, y se utilizan para monitorizar la expresión de 84 genes relacionados con una patología o vía de transmisión, además de múltiples genes de referencia. Cada panel de enfoque incluye elementos de control para lo siguiente:

Descuentos por múltiples platos

Análisis de datos complementarios

La herramienta de análisis de datos gratuita basada en la web del Centro de análisis de datos GeneGlobe incluye un asistente fácil de usar que lo guiará paso a paso a través de la normalización y el análisis de sus datos y genera cifras de resultados listas para publicar.

Procedimiento

- Ensayos de PCR de sonda LNA QuantiNova
- Ensayos de referencia de PCR de sonda LNA QuantiNova
- Ensayos personalizados de PCR con sonda LNA QuantiNova
- Paneles de enfoque de PCR de sonda LNA QuantiNova
- Paneles de enfoque de lncRNA PCR de sonda LNA QuantiNova
- Paneles personalizados de PCR de sonda LNA QuantiNova
- Paneles flexibles de PCR con sonda LNA QuantiNova

Elija qRT-PCR de uno o dos pasos

Los paneles QuantiNova LNA Probe PCR Focus se han optimizado con la química QuantiNova de alto rendimiento y eficacia comprobada. Los mejores resultados se obtienen al realizar la transcripción inversa con el kit QuantiNova Reverse Transcription. El ADNc resultante se cuantifica mediante qPCR utilizando las mezclas maestras del kit QuantiNova Probe PCR junto con los ensayos de su panel.

Para la qRT-PCR de un solo paso, recomendamos el kit QuantiNova Probe RT-PCR, que ofrece una configuración rápida de la reacción sin necesidad de optimizar las condiciones. Simplemente combine la plantilla de ARN con la mezcla maestra de RT-PCR lista para usar y los ensayos de su panel e inicie la reacción.

Flujo de trabajo rápido y sencillo

El flujo de trabajo, rápido y sencillo, se completa en menos de 2 horas con un mínimo de intervención y se puede automatizar para ahorrar aún más tiempo y esfuerzo. La compatibilidad de este sencillo protocolo se ha comprobado en los termocicladores de qPCR de las principales marcas (véase la figura). Los ensayos de PCR con sonda LNA QuantiNova ofrecen un rendimiento uniforme en todos los termocicladores. Además, el ADNc generado en el paso de RT se puede utilizar en todo el sistema de PCR con sonda LNA QuantiNova, lo que permite una transición fluida de los ensayos a los paneles según las necesidades de su investigación, ahorrando tiempo y muestras.

Lo que necesita para comenzar a utilizar el sistema PCR QuantiNova LNA Probe

Transcripción inversa: Kit de transcripción inversa QuantiNova

Mezcla maestra para qPCR: Kit de PCR con sonda QuantiNova

qRT-PCR de un solo paso (opcional): Kit de RT-PCR con sonda QuantiNova

Ensayos o paneles:

Aplicaciones

- Análisis, perfilado y cuantificación de la expresión de ARNm y ARNlnc
- Validación de datos de expresión génica de RNA-seq
- Perfil de expresión genética
- Análisis de señales y vías
- Confirmación de la supresión de la expresión genética mediante LNA GapmeRs o siRNAs
- Desarrollo de biomarcadores, incluyendo detección, identificación y validación de biomarcadores asociados a enfermedades.
- Seguimiento de cambios fenotípicos relacionados con la expresión genética

Los ensayos y paneles de PCR de sonda LNA QuantiNova son muy adecuados para aplicaciones que incluyen: