Qiagen, 249960, Paneles flexibles de PCR de LNA QuantiNova

Placa lista para usar con una selección personalizada de ensayos de panel de enfoque en formato de 96 o 384 pocillos para cualquier ciclador. Pedido mínimo de 4 a 12 placas, según la configuración; descuento al pedir 6 o más copias de la misma placa: 15 % de descuento para 6-11 placas; 30 % de descuento para 12-23 placas; 50 % de descuento para más de 24 placas.

Características

- Construya su propio panel con cualquier combinación de ensayos de nuestros ensayos Focus Panel catalogados
- Fácil realización de pedidos en línea a través de la intuitiva herramienta de creación personalizada
- Sensibilidad y especificidad excepcionales utilizando cebadores cortos mejorados con LNA
- Estabilidad para la configuración de temperatura ambiente que permite la automatización
- Resultados robustos y reproducibles en menos de 2 horas utilizando el kit PCR QuantiNova SYBR ® Green

Detalles del producto

Los paneles flexibles QuantiNova LNA PCR permiten la elaboración de perfiles de expresión génica de forma rápida y fiable mediante qPCR basada en SYBR® Green. Simplemente adapte uno de nuestros paneles Focus existentes a sus necesidades o cree uno nuevo con ensayos de nuestros paneles Focus catalogados. La mejora de LNA nos permite diseñar cebadores más cortos con una Tm óptima, lo que permite un posicionamiento flexible en la diana para una discriminación de secuencia óptima. Una validación exhaustiva del diseño garantiza un rendimiento superior y una detección robusta. Optimizado con la química QuantiNova, el sencillo flujo de trabajo se completa en tan solo 2 horas y es lo suficientemente robusto como para permitir la configuración a temperatura ambiente, la automatización y la ejecución diferida. También ofrecemos paneles personalizados, totalmente personalizables con los ensayos prediseñados o personalizados que prefiera.

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Actuación

Mejora experta de LNA para un rendimiento superior de qPCR

Los ensayos de los paneles flexibles QuantiNova LNA PCR se han desarrollado utilizando estrictos criterios de diseño y algoritmos validados en laboratorio. Veinte años de experiencia en el diseño de LNA nos han permitido optimizar nuestro sofisticado algoritmo, que incorpora más de 50 parámetros diferentes para garantizar el ensayo más óptimo para la detección exitosa de la diana. Cada conjunto de cebadores ofrece la máxima especificidad y eficiencia para obtener resultados fiables y precisos. La mejora de LNA permite la normalización de la Tm en todo el panel, lo que proporciona a los cebadores una mayor afinidad de unión y aumenta drásticamente la sensibilidad y especificidad del ensayo.

La mayor sensibilidad garantiza una excelente eficiencia de amplificación de hasta una molécula de ARN, lo que facilita la detección de dianas de baja abundancia, como lncRNA, a partir de menos material de partida (véase la figura). Los ensayos de PCR QuantiNova LNA proporcionan una cuantificación precisa, sensible y lineal de dianas en un amplio rango dinámico y la figura. Los ensayos de PCR QuantiNova LNA permiten la detección de ARNm tanto de alta como de baja expresión. La mayor especificidad, gracias a la inteligente colocación de LNA, proporciona una alta relación señal-ruido, lo que permite la discriminación de secuencias que difieren en un solo nucleótido y elimina la amplificación inespecífica y la formación de dímeros de cebadores.

La alta afinidad de unión de las bases de LNA aumenta la flexibilidad de la colocación de cebadores en el transcrito, lo que nos permite usar un posicionamiento inteligente para diseñar ensayos para dianas que de otro modo serían difíciles de analizar. Esto proporciona una cuantificación robusta y fiable, incluso para dianas ricas en AU, transcripciones de baja abundancia, dianas con alta estructura secundaria y muestras de alta complejidad.

Principio

Formato de placa: Número de ensayos diferentes por placa
Disco de 96 o 100 pocillos: 8 ensayos
12 ensayos: 12 ensayos x 8 muestras
16 ensayos: 16 ensayos x 6 muestras
24 ensayos: 24 ensayos x 4 muestras
32 ensayos: 32 ensayos x 3 muestras
48 ensayos: 48 ensayos x 2 muestras
96 ensayos: 96 ensayos x 1 muestra
384 pocillos: 8 ensayos
12 ensayos: 12 ensayos x 32 muestras
16 ensayos: 16 ensayos x 24 muestras
24 ensayos: 24 ensayos x 16 muestras
32 ensayos: 32 ensayos x 12 muestras
48 ensayos (horizontal): 48 ensayos x 8 muestras
48 ensayos (vertical normal): 48 ensayos x 8 muestras
64 ensayos: 64 ensayos x 6 muestras
96 ensayos: 96 ensayos x 4 muestras
128 ensayos: 128 ensayos x 3 muestras
192 ensayos: 192 ensayos x 2 muestras
384 ensayos: 384 ensayos x 1 muestra

Cantidad de placas solicitadas: Descuento (%)
1–5: 0
6–11: 15
12–23:30
24+: 50

Detección de alto rendimiento basada en SYBR ® Green

Los paneles flexibles QuantiNova LNA PCR utilizan detección basada en SYBR® Green, que, junto con un sistema de PCR altamente específico, cebadores bien diseñados y condiciones de reacción optimizadas, ofrece varias ventajas sobre la detección con sonda de hidrólisis. En primer lugar, es posible realizar un análisis de la curva de fusión inmediatamente después de la PCR, lo que permite confirmar la alta especificidad de la reacción y descartar la formación de dímeros de cebadores o amplicones inespecíficos. También proporciona mayor flexibilidad en el diseño del ensayo, ya que solo se necesitan dos cebadores, en lugar de dos cebadores y una sonda. Además, mientras que los cebadores garantizan la especificidad de la detección, las propiedades de unión del colorante permiten el análisis de múltiples dianas diferentes sin necesidad de sintetizar sondas marcadas específicas para cada diana, lo que reduce los costes de configuración y funcionamiento del ensayo.

Elija entre los ensayos de nuestros paneles de enfoque catalogados

Los paneles QuantiNova LNA PCR Focus incluyen los ensayos necesarios para un panel exhaustivamente investigado de genes relevantes para vías o enfermedades. Los ensayos prediseñados se han diseñado utilizando nuestro algoritmo patentado para proporcionar el análisis más sensible, preciso y eficaz. La mayoría de los ensayos abarcan intrones cuando es posible y detectan únicamente ARN. Los ensayos que no abarcan un intrón se designan como tales, y si hay un exón en la diana, las señales no deseadas se pueden eliminar fácilmente utilizando el kit de transcripción inversa QuantiNova con el paso integrado de eliminación de ADNg.

Panel flexible vs. panel personalizado

Los paneles flexibles QuantiNova LNA PCR son un producto semipersonalizable y están disponibles en formatos de placa de 96 pocillos, placa de 384 pocillos y disco de 100 pocillos, con hasta 96 ensayos diferentes en cada placa. Los paneles flexibles solo pueden contener ensayos de nuestros paneles Focus disponibles. Nuestro práctico generador de ensayos personalizados le permite cargar fácilmente el contenido de la placa de un panel Focus existente y cambiar los ensayos según sus necesidades. También se pueden añadir ensayos de genes de referencia y controles de nuestros paneles Focus.

Los paneles personalizados QuantiNova LNA PCR son un producto totalmente personalizable y también están disponibles en formatos de placa de 96 pocillos, placa de 384 pocillos y disco de 100 pocillos, con todos nuestros diferentes diseños de placa disponibles. El generador de placas personalizado le permite cargar su propia lista de dianas y añadir cualquier ensayo prediseñado o personalizado que desee. También puede añadir cualquier gen de referencia, ensayo de control y controles.

Análisis de datos complementarios

La herramienta de análisis de datos gratuita basada en la web del Centro de análisis de datos GeneGlobe incluye un asistente fácil de usar que lo guiará paso a paso a través de la normalización y el análisis de sus datos y genera cifras de resultados listas para publicar.

Procedimiento

- Ensayos de PCR de LNA QuantiNova
- Ensayos de referencia de PCR de LNA QuantiNova
- Ensayos personalizados de PCR de LNA de QuantiNova
- Paneles de enfoque de PCR LNA QuantiNova
- Paneles de enfoque de lncRNA PCR LNA de QuantiNova
- Paneles personalizados de PCR LNA QuantiNova
- Paneles flexibles de PCR LNA QuantiNova

Elija qRT-PCR de uno o dos pasos

Los paneles flexibles QuantiNova LNA PCR se han optimizado con la química QuantiNova de alto rendimiento y eficacia comprobada. Los mejores resultados se obtienen al realizar la transcripción inversa con el kit de transcripción inversa QuantiNova. El ADNc resultante se cuantifica mediante qPCR utilizando las mezclas maestras del kit QuantiNova SYBR® Green PCR junto con los ensayos de su panel.

Para la qRT-PCR de un solo paso, recomendamos el kit QuantiNova SYBR® Green RT-PCR, que ofrece una rápida configuración de la reacción sin necesidad de optimizar las condiciones. Simplemente combine la plantilla de ARN con la mezcla maestra de RT-PCR lista para usar y los ensayos de su panel e inicie la reacción.

Flujo de trabajo rápido y sencillo

El flujo de trabajo, rápido y sencillo, se completa en tan solo 2 horas con mínima intervención y se puede automatizar para ahorrar aún más tiempo y esfuerzo. La compatibilidad de este sencillo protocolo se ha comprobado en los termocicladores de qPCR de las principales marcas (véase la figura). Los ensayos de PCR de LNA QuantiNova ofrecen un rendimiento uniforme en todos los termocicladores. Además, el ADNc generado en el paso de RT se puede utilizar en todo el sistema de PCR de LNA QuantiNova, lo que permite una transición fluida de los ensayos a los paneles según las necesidades de su investigación, ahorrando tiempo y muestras.

Lo que necesita para comenzar a utilizar el sistema PCR LNA QuantiNova

Transcripción inversa: Kit de transcripción inversa QuantiNova

Mezcla maestra para qPCR: Kit de PCR QuantiNova SYBR ® Green

qRT-PCR de un solo paso (opcional): Kit de RT-PCR QuantiNova SYBR ® Green

Ensayos o paneles:

Aplicaciones

- Análisis, perfilado y cuantificación de la expresión de ARNm y ARNlnc
- Validación de datos de expresión génica de RNA-seq
- Perfil de expresión genética
- Análisis de señales y vías
- Confirmación de la supresión de la expresión genética mediante LNA GapmeRs o siRNAs
- Desarrollo de biomarcadores, incluyendo detección, identificación y validación de biomarcadores asociados a enfermedades.
- Seguimiento de cambios fenotípicos relacionados con la expresión genética

Los paneles flexibles QuantiNova LNA PCR son ideales para aplicaciones que incluyen: