Qiagen, 250269, Kit de UFC estándar de Acholeplasma laidlawii

UFC estándar de Mycoplasma QIAcuity, control negativo de Mycoplasma QIAcuity

Características

- Ensayo basado en sonda para cuantificar y detectar 127 especies diferentes de micoplasma
- Flujo de trabajo compatible con la farmacopea, que incluye 10 estándares UFC de Mycoplasma diferentes para validación y controles de sensibilidad positivos opcionales.
- Informe de validación de terceros disponible

Detalles del producto

El kit QIAcuity Mycoplasma Quant detecta y cuantifica de forma fiable la presencia de ARNr de micoplasma en diversos tipos de muestras. Combinado con un método de preparación de muestras recomendado, ofrecemos un flujo de trabajo NAT (Técnica de Ácidos Nucleicos) para el análisis de micoplasma, conforme a las Farmacopeas Europea, Estadounidense y Japonesa. Este robusto proceso elimina el laborioso cultivo de micoplasma. El flujo de trabajo es especialmente adecuado para tipos de muestras de pureza variable (por ejemplo, muestras de bancos de células, muestras en proceso, como la cosecha de virus y lotes finales).

El kit QIAcuity Mycoplasma Quant proporciona una detección consistente, precisa, exacta y altamente reproducible de la presencia de micoplasmas. La detección mediante ARNr ofrece una mayor sensibilidad que la del ADN debido a las múltiples copias presentes en una sola célula bacteriana. El ensayo también puede detectar ADN incluso si se omite el paso de RT, lo que ofrece un alto grado de flexibilidad.

El kit es compatible con el sistema de PCR digital QIAcuity y las nanoplacas QIAcuity.

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Actuación

Utilice el kit QIAcuity Mycoplasma Quant para detectar la contaminación por micoplasma en cultivos celulares y productos farmacéuticos durante las diferentes etapas de fabricación. Benefíciese de un flujo de trabajo totalmente compatible con las farmacopeas europea, estadounidense y japonesa. Descargue un informe de validación completo para evaluar el rendimiento del kit y sus estándares. Tenga en cuenta que debe verificar la validación para su matriz de muestra específica antes del primer uso.

Principio

El QIAcuity Mycoplasma Quant Kit, junto con el QIAcuity Digital PCR System, forman una solución única para detectar y cuantificar la contaminación por micoplasma. El flujo de trabajo basado en PCR digital ofrece una combinación ganadora de rendimiento, facilidad de uso y cumplimiento con la Farmacopea Europea (EP; capítulo 2.6.7), la Farmacopea Estadounidense (UP; capítulo <63>) y la Farmacopea Japonesa (JP; capítulo G3-14-170). Además de las 10 especies de micoplasma mencionadas en las Farmacopeas, puede detectar otras 127 especies de micoplasma utilizando el QIAcuity Mycoplasma Quant Kit. Para evaluar el rendimiento del flujo de trabajo, descargue un informe de validación de un tercero independiente, Minerva Biolabs GmbH (Berlín, Alemania).

El flujo de trabajo validado consta de solo dos pasos. Primero, se extraen los ácidos nucleicos de la muestra y luego se analizan mediante RT-dPCR. Con la química de la sonda QIAcuity OneStep Advanced, puede realizar la transcripción inversa y la PCR en un solo paso. Si bien recomendamos detectar micoplasmas mediante un protocolo de RT-dPCR, también puede detectar ADN directamente en una reacción de PCR digital sin el paso de RT.

Aquí se describe el principio de la reacción dPCR en las nanoplacas.

Procedimiento

El flujo de trabajo validado consta de dos pasos: se extraen los ácidos nucleicos de la muestra y se analizan mediante RT-dPCR. Con la química de la sonda QIAcuity OneStep Advanced Probe, la transcripción inversa y la PCR necesarias se realizan en un solo paso práctico. Si bien recomendamos detectar micoplasmas mediante el protocolo RT-dPCR descrito a continuación, el ensayo también detecta ADN y puede utilizarse en una reacción de dPCR sin el paso de RT.

Preparación de muestras

Para detectar con fiabilidad la contaminación por micoplasma, la muestra debe estar libre de inhibidores de RT y PCR, así como de otras impurezas. Como control general de inhibidores, puede añadir el Control Interno QIAcuity Mycoplasma al tampón de lisis antes de la extracción de la muestra. Puede utilizar directamente el eluido para la detección de micoplasma con el kit QIAcuity Mycoplasma Quant y la química correspondiente de la sonda QIAcuity OneStep Advanced.

Kit de sonda avanzada QIAcuity OneStep

Combine la transcripción inversa y la PCR para detectar la contaminación por micoplasma sin configurar una reacción de RT separada combinando la enzima de transcripción inversa (RT) HotStart, la ADN polimerasa HotStart QuantiNova, componentes químicos patentados y el ensayo de micoplasma QIAcuity.

Ensayo de micoplasma QIAcuity

El ensayo QIAcuity Mycoplasma incluye una mezcla de cebador-sonda 20x marcada con FAM para la detección de una diana específica de ARNr de micoplasma y una mezcla de cebador-sonda marcada con HEX para la detección opcional del control interno QIAcuity Mycoplasma. Hemos probado exhaustivamente esta reacción dúplex para detectar interferencias. Con este ensayo, puede confiar en un único control para la extracción de ARN, la transcripción inversa, la amplificación y la detección, eliminando la necesidad de reacciones adicionales.

Aplicaciones

El kit y los estándares QIAcuity Mycoplasma Quant están diseñados para detectar y cuantificar la contaminación por micoplasma en cultivos celulares y procesos de desarrollo biofarmacéutico.