Qiagen, 28115, columnas de centrifugación QIAquick (100)

Para la purificación de fragmentos de ADN a partir de PCR, fragmentos de gel y reacciones enzimáticas para usar con los restos de tampón del kit de eliminación de nucleótidos QIAquick

Características

- Recuperación de hasta el 95% de ADN listo para usar
- Limpieza de ADN de hasta 10 kb en tres sencillos pasos
- Tinte de carga de gel para un análisis de muestras conveniente
- Kit combinado para extracción de gel y limpieza de PCR
- Columnas giratorias disponibles por separado

Detalles del producto

El kit de purificación de PCR QIAquick incluye columnas de centrifugación, tampones y tubos de recolección para la purificación con membrana de sílice de productos de PCR >100 pb. El ADN de hasta 10 kb se purifica mediante un procedimiento sencillo y rápido de unión-lavado-elución con un volumen de elución de 30-50 μl. Un indicador de pH opcional permite determinar fácilmente el pH óptimo para la unión del ADN a la columna de centrifugación. El procedimiento se puede automatizar completamente en el QIAcube Connect.

Para obtener resultados óptimos se recomienda utilizar este producto junto con QIAvac 24 Plus.

Los protocolos estándar de purificación por PCR QIAquick también pueden ejecutarse mediante el sistema TRACKMAN Connected, en combinación con las pipetas PIPETMAN M Connected, ambas de Gilson. El sistema TRACKMAN Connected guía a los investigadores a través de los protocolos de purificación por PCR QIAquick, a la vez que ajusta automáticamente la configuración de las pipetas PIPETMAN M Connected con Bluetooth. Cada paso de la ejecución del protocolo se registra para agilizar la generación de informes mediante la generación de un informe completo. Descargue más información.

Actuación

El procedimiento de purificación por PCR QIAquick elimina cebadores, nucleótidos, enzimas, aceite mineral, sales y otras impurezas de las muestras de ADN (véase la figura "Eliminación completa de cebadores tras la PCR"). Mediante una microcentrífuga o un colector de vacío, se purifica ADN de entre 100 pb y 10 kb.

Principio

Los kits QIAquick contienen una membrana de sílice para la unión del ADN en un tampón con alto contenido de sal y la elución con tampón con bajo contenido de sal o agua. El procedimiento de purificación elimina cebadores, nucleótidos, enzimas, aceite mineral, sales, agarosa, bromuro de etidio y otras impurezas de las muestras de ADN (véase la figura "Eliminación completa de cebadores tras la PCR"). La tecnología de membrana de sílice elimina los problemas e inconvenientes asociados con las resinas sueltas y las suspensiones. Los tampones de unión especializados están optimizados para aplicaciones específicas y promueven la adsorción selectiva de moléculas de ADN dentro de rangos de tamaño específicos.

Tinte de carga de gel

Para un procesamiento y análisis de muestras más rápidos y prácticos, se proporciona un colorante de carga de gel. El colorante de carga GelPilot contiene tres colorantes de seguimiento (cianol de xileno, azul de bromofenol y naranja G) para optimizar el tiempo de ejecución del gel de agarosa y evitar que los fragmentos de ADN más pequeños migren demasiado (véase la figura "Colorante de carga GelPilot").

Procedimiento

El sistema QIAquick utiliza un sencillo procedimiento de unión, lavado y elución (véase el diagrama de flujo "Procedimiento QIAquick y MinElute"). El tampón de unión se añade directamente a la muestra de PCR u otra reacción enzimática, y la mezcla se aplica a la columna de centrifugación QIAquick. El tampón de unión contiene un indicador de pH, lo que facilita la determinación del pH óptimo para la unión del ADN (véase la figura "Colorante indicador de pH"). Los ácidos nucleicos se adsorben a la membrana de sílice en las condiciones de alta salinidad proporcionadas por el tampón. Las impurezas se eliminan y el ADN puro se eluye con un pequeño volumen del tampón de baja salinidad proporcionado o con agua, listo para usar en todas las aplicaciones posteriores.

Manejo

Las columnas de centrifugación QIAquick están diseñadas para ofrecer dos prácticas opciones de manejo. Se adaptan a una microcentrífuga de sobremesa convencional o a cualquier colector de vacío con conectores Luer, como QIAvac 24 Plus con adaptadores Luer QIAvac. El kit de purificación de PCR QIAquick, además de otros kits de columnas de centrifugación QIAGEN, puede automatizarse completamente en el QIAcube, lo que permite una mayor productividad y la estandarización de los resultados (véanse las figuras "Opciones de manejo de columnas de centrifugación A, B, C y D" y "QIAcube Connect").

Aplicaciones

Los fragmentos de ADN purificados con el sistema QIAquick están listos para su uso directo en todas las aplicaciones, incluida la secuenciación, el análisis de microarrays, la ligadura y transformación, la digestión por restricción, el etiquetado, la microinyección, la PCR y la transcripción in vitro.