Qiagen, 28206, Kit de limpieza de reacción MinElute (250)

Columnas de centrifugación MinElute de 250 ml, tampones y tubos de recolección (2 ml)

Características

- Volúmenes de elución muy pequeños
- Procedimiento rápido y fácil manejo.
- Recuperaciones altas y reproducibles
- Tinte de carga de gel para un análisis de muestras conveniente

Detalles del producto

El kit de limpieza de reacciones MinElute incluye columnas de centrifugación, tampones y tubos de recolección para la purificación mediante membrana de sílice de ADN de 70 pb a 4 kb procedente de reacciones enzimáticas. Las columnas de centrifugación están diseñadas para permitir la elución en volúmenes muy pequeños (tan solo 10 µl), lo que proporciona ADN altamente concentrado con altos rendimientos. Un indicador de pH integrado facilita la determinación del pH óptimo para la unión del ADN a la columna de centrifugación. El procedimiento se puede automatizar completamente en el QIAcube Connect. Los fragmentos de ADN purificados con el sistema MinElute están listos para su uso directo en todas las aplicaciones, como secuenciación, análisis de microarrays, ligación y transformación, digestión por restricción, marcaje, microinyección, PCR y transcripción in vitro.

Para obtener resultados óptimos se recomienda utilizar este producto junto con QIAvac 24 Plus.

Actuación

Proteína: Peso molecular por subunidad enzimática (kDa)
ADN polimerasa I: 109
Fragmento de Klenow: 62
Fosfatasa alcalina intestinal de ternera: 69
Ligasa de ADN T4: 55
Polinucleótido quinasa T4: 35
Transferasa terminal: 32
DNasa I: 31
Enzimas de restricción: Varía

El kit de limpieza de reacciones MinElute garantiza la limpieza de hasta 5 µg de ADN (70 pb a 4 kb) en reacciones enzimáticas, lo que proporciona altos rendimientos de ADN, ideal para diversas aplicaciones. El kit incluye columnas de centrifugación para la limpieza de reacciones enzimáticas. Mediante una microcentrífuga o un colector de vacío, se alcanza rápidamente una alta concentración de fragmentos de ADN (70 pb a 4 kb). (Los fragmentos de ADN mayores de 4 kb deben purificarse con el sistema QIAquick).

Principio

Los kits MinElute contienen una membrana de sílice para la unión del ADN en un tampón con alto contenido salino y la elución con tampón con bajo contenido salino o agua. El procedimiento de purificación elimina cebadores, nucleótidos, enzimas, aceite mineral, sales, agarosa, bromuro de etidio y otras impurezas de las muestras de ADN. La tecnología de membrana de sílice elimina los problemas e inconvenientes asociados con las resinas sueltas y las suspensiones. Los tampones de unión especializados están optimizados para aplicaciones específicas y promueven la adsorción selectiva de moléculas de ADN dentro de rangos de tamaño específicos.

Tinte de carga de gel

Para un procesamiento y análisis de muestras más rápidos y prácticos, se proporciona un colorante de carga de gel. El colorante de carga GelPilot contiene tres colorantes de seguimiento (cianol de xileno, azul de bromofenol y naranja G) para optimizar el tiempo de ejecución del gel de agarosa y evitar que los fragmentos de ADN más pequeños migren demasiado (véase la figura "Colorante de carga GelPilot").

Procedimiento

El sistema MinElute utiliza un sencillo procedimiento de unión, lavado y elución (véase el diagrama de flujo "Procedimiento MinElute"). El tampón de unión se añade directamente a la reacción enzimática y la mezcla se aplica a la columna de centrifugación MinElute. El tampón de unión contiene un indicador de pH, lo que facilita la determinación del pH óptimo para la unión del ADN (véase la figura "Colorante indicador de pH"). Los ácidos nucleicos se adsorben a la membrana de sílice en las condiciones de alta salinidad proporcionadas por el tampón. Las impurezas se eliminan y el ADN puro se eluye con un pequeño volumen del tampón de baja salinidad proporcionado o con agua, listo para su uso en aplicaciones posteriores.

Manejo

Las columnas de centrifugación MinElute están diseñadas para ofrecer dos prácticas opciones de manejo (véase el diagrama de flujo "Procedimiento MinElute"). Se adaptan a una microcentrífuga de sobremesa convencional o a cualquier colector de vacío con conectores Luer, como QIAvac 24 Plus o QIAvac 6S con adaptadores Luer QIAvac. El kit de limpieza de reacción MinElute, además de otros kits de QIAGEN basados ​​en columnas de centrifugación, puede automatizarse completamente en QIAcube Connect, lo que permite una mayor productividad y la estandarización de los resultados (véanse las figuras "Opciones de manejo de columnas de centrifugación A, B, C, D y E" y "QIAcube Connect").

Aplicaciones

- Secuenciación
- Análisis de microarrays
- Ligadura y transformación
- Digestión con restricción
- Etiquetado

Los fragmentos de ADN purificados con el sistema MinElute están listos para su uso directo en todas las aplicaciones, incluidas: