Qiagen, 28306, Kit de eliminación de nucleótidos QIAquick (250)

250 columnas de centrifugación QIAquick, tampones y tubos de recolección (2 ml)

Características

- Recuperación de hasta el 95% de ADN listo para usar
- Procedimiento rápido y cómodo
- Limpieza de ADN de hasta 10 kb en tres sencillos pasos
- Tinte de carga de gel para un análisis de muestras conveniente

Detalles del producto

El kit de eliminación de nucleótidos QIAquick proporciona columnas de centrifugación, tampones y tubos de recolección para la purificación de oligonucleótidos y ADN mediante membrana de sílice. Se eliminan los nucleótidos no incorporados, las sales y otros contaminantes, y los oligonucleótidos (>17 nt) y fragmentos de ADN de entre 40 pb y 10 kb se purifican mediante un procedimiento sencillo y rápido de unión, lavado y elución con un volumen de elución de 30 a 200 µl. El procedimiento está totalmente automatizado en el QIAcube Connect.

Actuación

El procedimiento de eliminación de nucleótidos QIAquick elimina nucleótidos, enzimas, sales y otras impurezas de las muestras de ADN (consulte la figura "Eliminación completa de nucleótidos de oligos marcados"). Utilizando una microcentrífuga, se purifica ADN de 17 meros – 10 kb. Para volúmenes de muestra inferiores a 50 µl también se puede utilizar el kit DyeEx Spin.

Principio

Los kits QIAquick contienen una membrana de sílice para la unión del ADN en un tampón con alto contenido de sal y la elución con tampón con bajo contenido de sal o agua. El procedimiento de purificación elimina cebadores, nucleótidos, enzimas, aceite mineral, sales, agarosa, bromuro de etidio y otras impurezas de las muestras de ADN (véase la figura "Eliminación completa de nucleótidos de oligonucleótidos marcados"). La tecnología de membrana de sílice elimina los problemas e inconvenientes asociados con las resinas sueltas y las suspensiones. Los tampones de unión especializados están optimizados para aplicaciones específicas y promueven la adsorción selectiva de moléculas de ADN dentro de rangos de tamaño específicos.

Tinte de carga de gel

Para un procesamiento y análisis de muestras más rápidos y prácticos, se proporciona un colorante de carga en gel. El colorante de carga GelPilot contiene tres colorantes de seguimiento (cianol de xileno, azul de bromofenol y naranja G) para optimizar el tiempo de ejecución del gel de agarosa y evitar que los fragmentos de ADN más pequeños migren demasiado (véase la figura "Colorante de carga GelPilot").

Procedimiento

El sistema QIAquick utiliza un sencillo procedimiento de unión, lavado y elución (véase el diagrama de flujo "Procedimiento de eliminación de nucleótidos QIAquick"). El tampón de unión se añade directamente a la muestra y la mezcla se aplica a la columna de centrifugación QIAquick. Los ácidos nucleicos se adsorben a la membrana de sílice en las condiciones de alta salinidad proporcionadas por el tampón. Las impurezas se eliminan y el ADN puro se eluye con un pequeño volumen del tampón de baja salinidad proporcionado o con agua, listo para usar en aplicaciones posteriores.

Manejo

Las columnas de centrifugación QIAquick están diseñadas para ofrecer dos prácticas opciones de manejo. Se integran en una microcentrífuga de sobremesa convencional. El kit de eliminación de nucleótidos QIAquick, además de otros kits de columnas de centrifugación QIAGEN, se puede automatizar completamente en QIAcube Connect, lo que permite una mayor productividad y la estandarización de los resultados (véanse las figuras "Opciones de manejo de columnas de centrifugación A" y "QIAcube Connect").

Aplicaciones

Los fragmentos de ADN purificados con el sistema QIAquick están listos para su uso directo en todas las aplicaciones, incluida la secuenciación, el análisis de microarrays, la ligadura y transformación, la digestión por restricción, el etiquetado y la microinyección.