Qiagen, 28706, Kit de extracción de gel QIAquick (250)

Para extracción de gel o limpieza de 250 reacciones: 250 columnas de centrifugación QIAquick, tampones, tubos de recolección (2 ml)

Características

- Recuperación de hasta el 95% de ADN listo para usar
- Procedimiento rápido y cómodo
- Limpieza de ADN de hasta 10 kb en tres sencillos pasos
- Tinte de carga de gel para un análisis de muestras conveniente
- Kit combinado para extracción de gel y limpieza por PCR

Detalles del producto

El kit de extracción de gel QIAquick proporciona columnas de centrifugación, tampones y tubos de recolección para la purificación con membrana de sílice de fragmentos de ADN a partir de geles (cortes de hasta 400 mg) o reacciones enzimáticas. El ADN de entre 70 pb y 10 kb se purifica mediante un procedimiento sencillo y rápido de unión, lavado y elución con un volumen de elución de 30-50 µl. Un indicador de pH integrado permite determinar fácilmente el pH óptimo para la unión del ADN a la columna de centrifugación. El kit de PCR y limpieza de gel QIAquick también proporciona tampones para la purificación de productos de PCR >100 pb y ADN de hasta 10 kb. El procedimiento se puede automatizar completamente en el QIAcube Connect.

Para obtener resultados óptimos se recomienda utilizar este producto junto con QIAvac 24 Plus.

Actuación

El kit de extracción en gel QIAquick permite la eliminación de nucleótidos, enzimas, sales, agarosa, bromuro de etidio y otras impurezas de las muestras, garantizando una recuperación de ADN de hasta el 80 % (véase la figura "Alta recuperación en geles"). Mediante una microcentrífuga o un colector de vacío, se purifica ADN de entre 70 pb y 10 kb a partir de 1 a 24 muestras. El ADN purificado puede utilizarse, por ejemplo, en secuenciación (véase la figura "Secuenciación fiable tras la extracción en gel"). Los fragmentos de ADN menores de 70 pb o mayores de 10 kb deben extraerse con el sistema de extracción en gel QIAEX II.

El procedimiento de purificación por PCR QIAquick elimina cebadores, nucleótidos, enzimas, aceite mineral, sales y otras impurezas de las muestras de ADN (véase la figura "Eliminación completa de cebadores tras la PCR"). Mediante una microcentrífuga o un colector de vacío, se purifica ADN de entre 100 pb y 10 kb.

Principio

Los kits QIAquick contienen una membrana de sílice para la unión del ADN en un tampón con alto contenido de sal y la elución con un tampón con bajo contenido de sal o agua. El procedimiento de purificación elimina cebadores, nucleótidos, enzimas, aceite mineral, sales, agarosa, bromuro de etidio y otras impurezas de las muestras de ADN (véase la figura "Alta recuperación de geles"). La tecnología de membrana de sílice elimina los problemas e inconvenientes asociados con las resinas sueltas y las suspensiones. Los tampones de unión especializados están optimizados para aplicaciones específicas y promueven la adsorción selectiva de moléculas de ADN dentro de rangos de tamaño específicos.

Tinte de carga de gel

Para un procesamiento y análisis de muestras más rápidos y prácticos, se proporciona un colorante de carga de gel. El colorante de carga GelPilot contiene tres colorantes de seguimiento (cianol de xileno, azul de bromofenol y naranja G) para optimizar el tiempo de ejecución del gel de agarosa y evitar que los fragmentos de ADN más pequeños migren demasiado (véase la figura "Colorante de carga GelPilot").

Procedimiento

El sistema QIAquick utiliza un sencillo procedimiento de unión, lavado y elución (véase el diagrama de flujo "Procedimiento QIAquick y MinElute"). Las láminas de gel se disuelven en un tampón con indicador de pH, lo que facilita la determinación del pH óptimo para la unión del ADN. La mezcla se aplica a la columna de centrifugación QIAquick (véase la figura "Colorante indicador de pH"). Los ácidos nucleicos se adsorben a la membrana de sílice en las condiciones de alta salinidad proporcionadas por el tampón. Las impurezas se eliminan y el ADN puro se eluye con un pequeño volumen del tampón de baja salinidad proporcionado o con agua, listo para usar en aplicaciones posteriores.

Manejo

Las columnas de centrifugación QIAquick están diseñadas para ofrecer dos prácticas opciones de manejo. Se adaptan a una microcentrífuga de sobremesa convencional o a cualquier colector de vacío con conectores Luer, como el QIAvac 24 Plus con adaptadores Luer QIAvac. El kit de extracción de gel QIAquick, además de otros kits de columnas de centrifugación QIAGEN, puede automatizarse completamente en el QIAcube Connect, lo que permite una mayor productividad y la estandarización de los resultados (véanse las figuras "Opciones de manejo de columnas de centrifugación A, B, C y D" y "QIAcube Connect").

Aplicaciones

Los fragmentos de ADN purificados con el sistema QIAquick están listos para su uso directo en todas las aplicaciones, incluida la secuenciación, ligadura y transformación, digestión por restricción, etiquetado, microinyección, PCR y transcripción in vitro.