Qiagen, 30761, Cartuchos Ni-NTA Superflow (5 x 5 ml)

5 cartuchos precargados con 5 ml de Ni-NTA Superflow: para la purificación automatizada de proteínas marcadas con His mediante sistemas de cromatografía líquida

Características

- La purificación más robusta en un solo paso en la más amplia gama de condiciones
- Altos rendimientos de proteína de alta pureza, con hasta 50 mg/ml
- Procesamiento rápido, fácil y reproducible en cualquier sistema LC

Detalles del producto

Ni-NTA Superflow, la resina más citada utilizada para la purificación de proteínas marcadas con His, está disponible en cartuchos prellenados de 1 ml y 5 ml para la purificación automatizada en sistemas de cromatografía líquida como los sistemas FPLC, ÄkTA y BioLogic, o para la purificación manual mediante una jeringa.

Actuación

Matriz: Volumen de la matriz
Perlas de agarosa magnéticas Ni-NTA (microescala): 100 μl
Ni-NTA Superflow (pequeña escala): 500 μl
Ni-NTA Superflow (escala media): 10 ml
Ni-NTA Superflow (a gran escala): 100 ml

Ni-NTA brinda un rendimiento superior en la entrega de altos rendimientos de proteína altamente purificada, en comparación con otras resinas (ver figura Ni-NTA supera a otras resinas para entregar altos rendimientos de proteínas de alta pureza ). Una comparación independiente con otras resinas de níquel disponibles comercialmente demostró que Ni-NTA Superflow muestra el nivel más bajo de lixiviación de níquel (ver figura Un estudio independiente muestra que Ni-NTA pierde menos níquel que cualquier otra resina probada ). La importancia aquí es que si el níquel se lixivia de la resina, los ligandos cargados restantes actúan como un intercambiador de iones y se unen a proteínas no marcadas que contaminarán las fracciones de elución. La mayor estabilidad de Ni-NTA significa que incluso en presencia de 10 mM de DTT se puede utilizar para obtener proteínas completamente activas y de alta pureza (ver figura El sitio de coordinación adicional en Ni-NTA se une al ion níquel con más fuerza que IDA ).

Como se muestra en la tabla, la pureza se mantiene alta en todas las escalas de purificación. Los cartuchos Ni-NTA Superflow forman parte de las soluciones integrales y complementarias para proteínas marcadas con His que ofrece QIAGEN (véase la figura «Purificación escalable de cantidades de nanogramos a gramos de proteínas marcadas con His»).

Principio

Desnaturalizantes: Detergentes
6 M Gu·HCl: 2 % Tritón X-100
8 M de urea: 2 % de Tween 20
1% CHAPS: 20 mM TCEP 20 mM

Las matrices de Ni-NTA son la solución de cromatografía de afinidad preferida para la purificación de proteínas marcadas con His (véase la figura "Purificación eficiente de proteínas marcadas con His en un solo paso"). Su alta estabilidad las hace compatibles con una amplia gama de componentes tampón, incluyendo desnaturalizantes potentes, detergentes e incluso agentes reductores (véase la tabla "Reactivos compatibles con la interacción His/Ni-NTA"). Esta flexibilidad permite a los investigadores desarrollar esquemas de purificación óptimos, a la vez que se benefician de las excelentes características de separación que ofrece el Ni-NTA, lo que a menudo hace innecesario un segundo paso cromatográfico.

Aplicaciones

Las matrices de Ni-NTA se pueden utilizar para ampliar la purificación de proteínas marcadas con His para estudios estructurales (por ejemplo, mediante cristalografía de proteínas o RMN) o para producir cantidades en gramos para la producción biofarmacéutica.