Qiagen, 32943, conjunto de vectores pQE Kan reprimidos en cis

25 ug cada uno: pQE-80-L-Kan, pQE-81L-Kan, pQE-82L-Kan

Características

- Expresión estrechamente regulada que conduce a una mayor estabilidad de las construcciones citotóxicas.
- No se requiere un segundo plásmido que codifique el represor en trans

Detalles del producto

Los vectores del conjunto de vectores pQE cis-reprimidos son similares a los del conjunto de vectores pQE N-Terminus, pero además expresan el producto del gen laclq, que reprime la expresión de la proteína antes de la inducción de IPTG. Esto elimina la necesidad de incluir este gen en otro plásmido. Se recomienda el uso de estos vectores cuando se expresan productos génicos tóxicos para E. coli.

Actuación

El conjunto de vectores pQE Kan reprimidos en cis contiene vectores con un gen de resistencia a la kanamicina además del gen de resistencia a la ampicilina que proporciona selección por antibiótico.

Principio

Los vectores pQE proporcionan una expresión de alto nivel de proteínas en E. coli y agregan la pequeña etiqueta de afinidad 6xHis a las construcciones de expresión de proteínas.

Procedimiento

Una vez incorporado al vector un inserto de ADN que codifica una proteína, este se transforma en células de E. coli y se induce la expresión proteica mediante la adición de IPTG al medio de cultivo. Tras la lisis celular, las proteínas marcadas con 6xHis se purifican mediante cromatografía de afinidad Ni-NTA en condiciones nativas o desnaturalizadas.

Aplicaciones

- Purificación de proteínas funcionales en condiciones nativas
- Purificación en condiciones desnaturalizantes para la generación de anticuerpos.
- Detección eficiente mediante anticuerpos anti·His y conjugados

Los vectores pQE de este producto proporcionan una expresión de alto nivel de proteína en E. coli, lo que permite: