Qiagen, 330231, Matriz de PCR RT2 Profiler

Matriz de PCR del perfilador RT2

Características

- Perfila 84 o 370 genes relacionados simultáneamente
- Los paneles diseñados por expertos se dirigen a los genes más relevantes
- Los ensayos verificados en laboratorio eliminan la tediosa optimización
- El procedimiento simple permite el uso rutinario con cualquier instrumento de PCR en tiempo real
- Las herramientas en línea complementarias hacen que el análisis de datos sea rápido y sencillo

Actuación

Sensibilidad

Con la sensibilidad del kit RT 2 First Strand, tan solo 1 ng o hasta 5 µg de ARN total por placa de matriz proporciona tasas de llamadas presentes superiores al 80 % (consulte la figura "Resultados positivos con tan solo 25 ng de ARN").

Reproducibilidad

El sistema de matriz PCR completo demuestra fuertes correlaciones entre réplicas técnicas, lotes e instrumentos con coeficientes de correlación promedio >0,99, lo que garantiza una detección confiable de diferencias en la expresión entre muestras biológicas (ver figura "Alta reproducibilidad entre diferentes usuarios").

Especificidad

El sistema de matriz de PCR, con ARN de entrada de alta calidad, produce bandas individuales del tamaño previsto sin dímeros de cebadores ni otros productos secundarios, lo que proporciona resultados de PCR en tiempo real altamente precisos (consulte la figura "Un solo producto específico del gen en cada reacción").

Eficiencia uniforme de amplificación por PCR

La tecnología de matrices de PCR requiere una eficiencia de amplificación por PCR uniforme para permitir comparaciones precisas de la expresión génica en todos los genes y muestras. La combinación única de nuestro algoritmo patentado de diseño de cebadores y las rigurosas pruebas de cada ensayo garantiza el alto rendimiento de cada ensayo en matrices de PCR (véase la figura "Las matrices de PCR producen resultados altamente precisos").

Un sistema garantizado

Las matrices de PCR RT² Profiler se prueban y optimizan en combinación con las mezclas maestras RT² SYBR Green qPCR y el kit RT² First Strand. Estas pruebas garantizan el rendimiento de la matriz de PCR RT² Profiler al utilizar estos tres componentes conjuntamente.

Principio

Las matrices de PCR RT 2 Profiler son herramientas fiables para analizar la expresión de un panel específico de genes. Cada matriz de PCR, ya sea de placa de 96 pocillos o de disco de 100 pocillos, incluye ensayos de cebadores optimizados con SYBR® Green para un panel exhaustivamente investigado de genes relevantes, centrados en vías o enfermedades. Las matrices de PCR RT 2 Profiler también se pueden personalizar para incluir un panel de genes adaptado a sus intereses de investigación específicos. El diseño de cebadores de alta calidad y la formulación de la mezcla maestra qPCR RT 2 SYBR® Green permiten que la matriz de PCR amplifique 96 o 384 productos específicos de genes simultáneamente en condiciones de ciclado uniformes.

Esta combinación proporciona al RT 2 Profiler PCR Array la especificidad y la alta eficiencia de amplificación necesarias para obtener resultados precisos de SYBR® Green en tiempo real. Los arrays de PCR son fáciles de usar en cualquier laboratorio de investigación.

Las matrices de PCR RT 2 Profiler son lo suficientemente sensibles para su uso con ARN preparado a partir de muestras regulares (0,1–5 µg de ARN), muestras FFPE y muestras pequeñas (1–100 ng de ARN). >

Procedimiento

- Normalización de datos
- Detección de contaminación del ADN genómico
- Calidad de la muestra de ARN
- Rendimiento general de PCR

Simplemente mezcle la plantilla de ADNc con la mezcla maestra de PCR lista para usar, alicuote volúmenes iguales en cada pocillo de la misma placa y ejecute el programa de ciclado de PCR en tiempo real (consulte el diagrama de flujo "Procedimiento simple"). Las matrices de PCR RT 2 Profiler son compatibles con todos los instrumentos QIAGEN, ABI, Bio-Rad, Eppendorf, Roche y Stratagene.

Diseño y controles flexibles

Las matrices de PCR RT 2 Profiler están disponibles en formatos de placa de 96 pocillos, placa de 384 pocillos y disco de 100 pocillos, y se utilizan para monitorizar la expresión de 84 o 370 genes relacionados con una enfermedad o vía de transmisión, además de 5 genes constitutivos. Cada matriz de PCR RT 2 Profiler también incluye elementos de control para:

Análisis de datos fácil de usar

Los datos pueden analizarse mediante una plantilla de análisis de datos fácil de usar en Excel o un software web. El análisis de datos se basa en el método ΔΔC T, con normalización de los datos brutos según los genes constitutivos.

Aplicaciones

- Inflamación del cáncer y perfil de citocinas
- Células madre
- Neurociencia
- Vías de transducción de señales
- Adhesión celular y migración celular
- Detección y validación de biomarcadores

Las matrices de perfiles de PCR RT² se pueden utilizar en todas las áreas de investigación biológica y médica, incluidas: