Qiagen, 330421, RT2 Kit de primera hebra fácil (12)

Kit de primera hebra RT2 EZ

Características

- Síntesis rápida y eficiente de ADNc de primera cadena
- Eliminación completa del ADN genómico
- Resultados con tan sólo 25 ng de ARN total por reacción
- El ADNc está inmediatamente listo para PCR en tiempo real

Detalles del producto

El kit RT² Easy First Strand ofrece un procedimiento rápido y práctico para la síntesis eficiente de ADNc de primera cadena y la eliminación de ADN genómico en muestras de ARN. Su formato único facilita el procesamiento en paralelo de múltiples muestras de ARN para la transcripción inversa. El ADNc sintetizado está listo para su uso en el análisis de expresión por PCR en tiempo real de múltiples genes cuando se utiliza con las mezclas maestras RT² SYBR Green, los ensayos de cebadores RT² qPCR u otros ensayos de cebadores disponibles comercialmente.

Principio

El kit incluye un procedimiento patentado para eliminar eficazmente el ADN genómico contaminante de las muestras de ARN antes de la transcripción inversa. Hexámeros aleatorios y cebadores oligo-dT activan la transcripción inversa de forma imparcial, y una transcriptasa inversa sintetiza el producto de ADNc con un rendimiento y una longitud óptimos. Un control de ARN externo integrado ayuda a monitorizar la eficiencia de la transcripción inversa y a detectar inhibidores enzimáticos. El kit RT 2 First Strand está optimizado para el análisis de la expresión génica mediante PCR en tiempo real mediante matrices de PCR RT 2 Profiler y ensayos de cebadores RT 2 qPCR, y puede utilizarse con éxito con otros ensayos de análisis de la expresión génica disponibles comercialmente.

Procedimiento

El tampón GE2 patentado y la muestra se mezclan y se incuban en un termociclador. Tras añadir la enzima y el tampón adicional, la muestra se somete a transcripción inversa utilizando cualquier termociclador. El ADNc transcrito está listo de inmediato para su uso en aplicaciones posteriores. Recomendamos las matrices de PCR RT² Profiler o los ensayos de cebadores RT² qPCR para análisis posteriores.

El kit RT² Easy First Strand produce resultados con tan solo 25 ng o hasta 5 µg de ARN total por reacción. Sin embargo, la cantidad óptima de material de partida depende de la abundancia relativa de los transcritos de interés. Los transcritos con menor abundancia requieren más ARN; los transcritos con mayor abundancia requieren menos ARN. Una mayor cantidad de ARN de entrada produce un mayor número de llamadas positivas (es decir, detección de expresión génica) en el rango dinámico lineal del método.