Qiagen, 338301, Ensayo de LNA dPCR personalizado (Clamp)

Abrazadera (bloqueador) diseñada por expertos altamente calificados utilizando herramientas de diseño interno optimizadas.

Características

- Diseñado por expertos altamente calificados que utilizan herramientas de diseño interno optimizadas
- Multiplexación de alto nivel en cualquier tipo de especie y aplicación
- Tecnología de ácido nucleico bloqueado (LNA) para una mayor especificidad y sensibilidad
- Adaptado a sus necesidades de diseño personalizado y disponible con servicio de verificación de laboratorio húmedo opcional

Detalles del producto

Los ensayos diseñados por expertos le permiten aprovechar al máximo el potencial de la dPCR para responder mejor a sus preguntas biológicas específicas. Colabore con QIAGEN para diseñar, ejecutar y, opcionalmente, verificar sus resultados, aprovechando nuestra experiencia en diseño de ensayos personalizados.

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Con un enlace a este formulario de solicitud: Solicitud de servicios genómicos (qiagen.com)

Actuación

La dPCR aumenta la sensibilidad en la detección y cuantificación absoluta de eventos raros y variantes de secuencia al crear una partición que incrementa la concentración de la diana específica. Por ejemplo, una mutación presente al 0,1 % puede detectarse en un fondo de ADN genómico de tipo silvestre mediante dPCR. La amplificación y detección de punto final sobre ruido, con una selección binaria de diana positiva/negativa, permite una cuantificación precisa, independiente del rendimiento de la amplificación (afectado, por ejemplo, por inhibidores de la PCR).

Principio

Según sus necesidades, los ensayos personalizados de dPCR LNA están diseñados para funcionar en configuraciones monomodo o multiplex, utilizando un enfoque basado en una sonda o en EvaGreen y un cebador. La PCR digital proporciona el método más sensible y fiable para detectar eventos raros sobre un fondo. Los ensayos personalizados de dPCR LNA utilizan cebadores y sondas mejorados con LNA, lo que aumenta la especificidad y la sensibilidad del ensayo, permitiendo detectar, por ejemplo, una mutación presente al 0,1 % en un fondo de ADN genómico de tipo salvaje en un solo pocillo de una nanoplaca.

Procedimiento

Para configurar su experimento de dPCR, añada una alícuota de su muestra de ADN genómico (aislada de muestras frescas, congeladas o fijadas) a la mezcla maestra incluida en el kit de PCR QIAcuity Probe o el kit de PCR QIAcuity EG junto con su ensayo de LNA dPCR personalizado. Cada reacción se analiza en uno o varios pocillos de una nanoplaca QIAcuity. Tras cargar y sellar la nanoplaca, seleccione el programa de ciclado recomendado en el instrumento QIAcuity. Una vez finalizada la dPCR, el número de copias/µl de cada secuencia diana se muestra en el paquete de software QIAcuity. Puede encontrar más detalles en el protocolo de inicio rápido del ensayo de LNA dPCR personalizado.

Aplicaciones

- Pruebas de aguas residuales de COVID-19
- Detección de mutaciones raras
- Variación del número de copias
- Expresión genética y análisis de miRNA
- Terapia celular y génica
- Detección de patógenos microbianos
- Validación NGS
- Detección de OMG