Qiagen, 339320, Kit de inicio de PCR de miARN miRCURY LNA

Dos ensayos de PCR miRCURY LNA de su elección, ensayo de control de adición (UniSp6), un ensayo de control endógeno candidato (miR-103-3p) y todos los reactivos para 20 reacciones de transcripción inversa y 100 amplificaciones de PCR; para detección de qPCR basada en SYBR® Green
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Características

- Introducción fácil y rentable al sistema qPCR de miRNA más sensible disponible
- Sin falsos positivos, solo señales de miRNA verdaderas
- Incluye plantilla de adición de ARN y un conjunto de cebadores de control para supervisar el rendimiento.
- Contiene todo lo necesario para realizar experimentos a pequeña escala.
- Protocolo rápido y muy sencillo

Detalles del producto

El kit de inicio de PCR miRCURY LNA miRNA contiene todos los reactivos necesarios para empezar a utilizar el sistema de PCR miRCURY LNA miRNA. El kit incluye un juego de cebadores de control de adición (UniSp6), un juego de cebadores de control endógenos candidatos (miR-103a-3p) y dos juegos de cebadores validados a su elección, mejorados con tecnología LNA. Los reactivos son suficientes para realizar 20 reacciones de transcripción inversa y 200 amplificaciones por PCR, lo que permite la cuantificación de hasta 20 muestras con un mínimo de 4 ensayos por muestra. ¿Desea probar esta solución por primera vez? Solicite un presupuesto para un kit de prueba.

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Actuación

Sensibilidad inigualable

La transcripción inversa universal, combinada con cebadores mejorados con LNA y normalizados con Tm, permite una cuantificación precisa y fiable de miARN individuales a partir de tan solo 1 pg de ARN total (véase la figura "Cuantificación precisa a partir de 1 pg de ARN total como material de partida"). Gracias a su excepcional sensibilidad y un fondo extremadamente bajo, es posible cuantificar con precisión niveles muy bajos de miARN sin preamplificación. Esto hace que el sistema de PCR miRCURY LNA miARN sea adecuado para todo tipo de muestras, especialmente aquellas con bajo contenido de ARN, como suero, plasma y otros biofluidos.

Principio

Reactivos de alto rendimiento para RT-PCR cuantitativa en tiempo real

miRCURY LNA RT Kit Este kit incluye todos los reactivos necesarios para realizar una poliadenilación de miRNA y una transcripción inversa rápidas y cómodas en un solo paso de reacción. El uso de una única reacción de RT universal como plantilla para las amplificaciones por PCR posteriores simplifica enormemente el procedimiento en comparación con los sistemas que requieren una síntesis de primera cadena específica de miRNA (véase la figura El beneficio de un paso de transcripción inversa universal). El UniSp6 RNA spike-in se puede utilizar con el ensayo de control – UniSp6 miRCURY LNA miRNA PCR Assay (n.º de cat. YP00203954) – como un control positivo de transcripción inversa y/o como un calibrador entre placas en nuestros paneles de PCR de miRNA. miRCURY LNA SYBR Green PCR Kit Este kit contiene la miRCURY SYBR Green Master Mix de alto rendimiento para la amplificación cuantitativa por PCR en tiempo real. La detección se basa en SYBR Green, que permite el control de calidad del amplicón de PCR resultante mediante el análisis de la curva de fusión. Los conjuntos de cebadores mejorados con LNA requieren condiciones específicas de reacción de PCR para un rendimiento óptimo. El kit también incluye un conjunto de cebadores de control diseñado para la amplificación del ARN sintético de adición, incluido en el kit miRCURY LNA RT. Consulte el manual del kit miRCURY LNA RT para obtener más información. Los ensayos y paneles de PCR de miARN miRCURY LNA se han validado con la mezcla maestra miRCURY SYBR Green; el uso de otros reactivos para qPCR afectará los resultados.

Procedimiento

El sistema de ensayo PCR miRCURY LNA miRNA es un sistema específico para miRNA, basado en LNA, diseñado para la detección sensible y precisa de miRNA mediante PCR cuantitativa en tiempo real con SYBR Green. El primer paso del procedimiento es la transcripción inversa universal, seguida de la amplificación por PCR en tiempo real con cebadores potenciados con LNA.

Aplicaciones

- Configuración de experimentos de cuantificación de miRNA
- Experimentos de control de miRNA

El kit de inicio de PCR miRCURY LNA miRNA se utiliza como parte del sistema PCR miRCURY para: