Qiagen, 339325, paneles de PCR miRCURY LNA miRNA Focus

Paneles de PCR miRCURY LNA miRNA para la creación de perfiles de miRNome basados ​​en aplicaciones, disponibles en formato de 96 o 384 pocillos; para detección basada en SYBR® Green

Características

- Paneles de PCR de miRNA listos para usar enfocados en aplicaciones particulares, tipos de muestras o enfermedades
- Rápido y fácil de usar sin necesidad de preamplificación.
- Protocolo simple para alta reproducibilidad y mínima variación técnica
- Discriminación fiable de miRNA estrechamente relacionados y miRNA maduros y precursores

Detalles del producto

Los paneles de PCR miRCURY LNA miRNA Focus permiten la elaboración de perfiles de miRNA excepcionalmente sensibles y específicos con el sistema de PCR miRCURY LNA miRNA. Estos paneles de cebadores de PCR están mejorados con tecnología LNA y son específicos para tipos de muestras, enfermedades o vías de expresión específicas, lo que proporciona una solución flexible que le permite centrarse en los miRNA relevantes para su aplicación. Los paneles de PCR miRCURY LNA miRNA Focus se prealicuotan en placas de PCR de 96 o 384 pocillos y están listos para usar.

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Actuación

- Pequeñas cantidades de ARN impiden el uso de métodos estándar de control de calidad del ARN
- El ARN del suero/plasma contiene inhibidores de las enzimas PCR
- Los genes de referencia estándar, como el U6, no están presentes en el suero ni en el plasma, lo que dificulta la elección de buenos genes de referencia.

Paneles de PCR de miRNA de suero/plasma

¿Por qué estudiar los miRNA en suero y plasma? Los miRNA están presentes en pequeñas cantidades en suero y plasma. Circulan en la sangre en una forma acelular altamente estable, lo que sugiere que están protegidos de las enzimas que degradan el ARN que se encuentran en la sangre (ver figuras Los miRNA son estables en suero y plasma y Perfil sérico completo de miRNA). Se ha demostrado que los perfiles de miRNA se alteran en suero y plasma tomados de pacientes que padecen cáncer y otras enfermedades. Esto hace que los miRNA sean candidatos prometedores para su uso en el descubrimiento no invasivo de nuevos biomarcadores importantes para una amplia gama de enfermedades y procesos biológicos. Las muestras de sangre son fáciles de obtener y conllevan poco riesgo para el paciente, en comparación con las biopsias y los procedimientos quirúrgicos. Desafíos del perfil de miRNA en suero y plasma El suero y el plasma solo contienen una fracción del ARN que se encuentra en la sangre completa (ver figura El suero y el plasma sanguíneos contienen pequeñas cantidades de ARN). La mayor parte del ARN se encuentra en la capa leucocítica, que consiste principalmente en glóbulos blancos y plaquetas. Para obtener perfiles de miARN precisos, es importante asegurarse de que el suero/plasma no esté contaminado con ARN de células sanguíneas, ya que esto distorsionaría los resultados del experimento. Existen otros desafíos al perfilar miARN en suero y plasma, entre ellos:

Superar estos desafíos requiere un sistema de qPCR de miRNA extremadamente preciso. El sistema de PCR de miRNA miRCURY LNA cuenta con un historial comprobado de detección fiable de miRNA en muestras de suero y plasma.

Paneles de PCR de miRNA de Cancer Focus

miRNA y cáncer Numerosos estudios han demostrado vínculos entre la desregulación de miRNA y varios estados patológicos, incluyendo una amplia gama de cánceres humanos. Se ha demostrado que los miRNA actúan como oncogenes y supresores tumorales. La alta estabilidad relativa de miRNA en materiales de origen clínico comunes (p. ej., bloques FFPE, plasma, orina, saliva, etc.) y la capacidad de los miRNA de funcionar como marcadores moleculares para tipos de tejidos discretos y estados patológicos han posicionado la cuantificación de miRNA como una nueva herramienta prometedora para una amplia gama de aplicaciones. Los miRNA se pueden usar como clasificadores de enfermedades para diferentes tipos de cáncer o como biomarcadores para monitorear los efectos de la terapia en el pronóstico y la progresión del cáncer. Identificar biomarcadores de miRNA o nuevos clasificadores Los paneles PCR de miRNA de Cancer Focus se pueden usar para muchos tipos de perfiles de miRNA de cáncer a partir de muestras que incluyen FFPE y biofluidos. Estos perfiles de miRNA se pueden utilizar para identificar firmas únicas de cáncer y ayudar a identificar biomarcadores o clasificadores para los tipos de cáncer y la progresión (ver las figuras Seis tipos de cáncer comparados y expresión de miRNA de cuatro tipos de cáncer). >

Paneles de PCR de miRNA enfocados en exosomas

Cómo se seleccionaron los ensayos Todos los ensayos de miRNA en los paneles de PCR de miRNA de Exosome Focus se seleccionaron con base en una combinación de datos experimentales de estudios internos sobre exosomas utilizando nuestro sistema de PCR de miRNA miRCURY LNA y resultados publicados en revistas revisadas por pares. Los ensayos no son una lista completa dirigida a todos los miRNA encontrados en exosomas, pero se dirigen a aquellos miRNA que se encuentran típicamente (ver figura Perfiles de miRNA en orina y LCR). Si la falta de algunos miRNA es una preocupación, recomendamos ejecutar un estudio completo de miRNome utilizando los paneles de PCR de miRNA miRCURY LNA miRNA miRNome.

Principio

- 96 pocillos, listas para usar: dos placas de PCR de 96 pocillos con un total de 179 conjuntos de cebadores de miARN LNA, comúnmente presentes en suero/plasma humano, incluyendo 7 miARN de referencia candidatos; compatibles con la mayoría de los instrumentos de PCR en tiempo real (véase la tabla a continuación). El producto a solicitar consta de 4 conjuntos de paneles (4 placas de 96 pocillos).
- 384 pocillos, lista para usar: una placa de PCR de 384 pocillos con dos réplicas de 179 conjuntos de cebadores de miARN LNA, comúnmente presentes en suero/plasma humano, incluyendo 7 miARN de referencia candidatos; compatible con la mayoría de los instrumentos de PCR en tiempo real (véase la tabla a continuación). El producto a solicitar consta de 4 conjuntos de paneles (2 placas de 384 pocillos).

- miR-103-3p, miR-191-5p y miR-423-5p: estos son genes de referencia potenciales que se encuentran en nuestros paneles de PCR miRNome y pueden ser utilizados por investigadores que migran a los paneles de enfoque.
- miR-93-5p y miR-425-5p: estos genes de referencia potenciales se eligen porque generalmente se expresan de manera estable en suero/plasma.
- miR-451a y miR-23a-3p: pueden utilizarse como control de hemólisis. Si el ∆C q (miR-23a-3p – miR-451a) es >7, podría indicar contaminación de las muestras de suero/plasma.

Formato de placa de 96 pocillos: un panel de enfoque oncológico en una placa de 96 pocillos. El producto a solicitar consta de 4 juegos de paneles (4 placas de 96 pocillos).
Formato de placa de 384 pocillos: ocho paneles Cancer Focus suministrados en dos placas de 384 pocillos (suficientes para 8 muestras). Estas placas están diseñadas específicamente para un pipeteo manual y multipipeteo rápido y sencillo. El producto a solicitar consta de 8 juegos de paneles (2 placas de 384 pocillos).

- 84 miRNAs específicamente vinculados al cáncer
- 3 genes de referencia de miARN: miR-103-3p, miR-191-5p, miR-423-5p
- genes de referencia de snRNA: SNORD49A, U6 snRNA, SNORD38B
- 3 calibradores interplaca (UniSp3 IPC)
- 5 picos de ARN (cel-miR-39-3p, UniSp2, UnuSp4, UniSp5 y UniSp6)

- Todos los miRNA expresados ​​típicamente encontrados en muestras de orina o líquido cefalorraquídeo en un panel de PCR
- Una solución altamente flexible que le permite centrarse en los miRNA relevantes para su proyecto de exosomas
- El diseñador de placas intuitivo permite reemplazar los ensayos en las placas antes de realizar el pedido.
- Sensibilidad y especificidad para un perfil preciso de miRNA
- El formato rápido y sencillo, listo para usar, permite la aplicación directa de la muestra y un perfil completo en menos de 3 horas.
- Alta compatibilidad Los formatos de 96 y 384 pocillos son compatibles con la mayoría de los instrumentos de PCR en tiempo real

- 87 conjuntos de cebadores de PCR de LNA de miRNA dirigidos a miRNA humanos expresados ​​en exosomas humanos de la orina
- 5 de los ensayos de miRNA también se pueden utilizar como posibles cebadores de control interno: hsa-miR-103-3p, hsa-miR-191-5p, hsa-miR-93-5p, hsa-miR-423-3p y hsa-miR-423-5p
- 5 controles de adición de ARN disponibles para su selección en el configurador de paneles para su uso como controles positivos (por ejemplo, para el control de calidad de la purificación de ARN y la reacción de RT)
- 3 calibradores entre placas (3 x UniSp3 IPC)

- 87 conjuntos de cebadores de PCR de LNA de miRNA dirigidos a miRNA humanos expresados ​​en exosomas humanos del líquido cefalorraquídeo
- 3 de los ensayos de miRNA también se pueden utilizar como posibles cebadores de control interno: hsa-miR-103-3p, hsa-miR-191-5p y hsa-miR-93-5p
- 5 controles de adición de ARN disponibles para su selección en el configurador para su uso como controles positivos (por ejemplo, para el control de calidad de la purificación de ARN y la reacción de RT)
- 3 calibradores entre placas (3 x UniSp3 IPC)

Paneles de PCR de miRNA de suero/plasma

Paneles de PCR de miRNA de Cancer Focus

Paneles de PCR de miRNA enfocados en exosomas