Qiagen, 339390, Kit de adición de ARN para RT

Contiene la mezcla de plantillas de ARN de adición UniSp2, UniSp4 y UniSp5 y la plantilla de ARN de adición cel-miR-39-3p

Características

- Un control fácil y cómodo de sus muestras de ARN y reacciones de RT
- Ahorre tiempo y reactivos al identificar de forma temprana muestras de mala calidad
- Disponible en un formato premezclado y fácil de usar.
- Altamente flexible: utiliza solo los picos que necesitas para tu estudio

Detalles del producto

El kit de adición de ARN permite el control de calidad del aislamiento de ARN, la síntesis de ADNc y la amplificación por PCR de los experimentos de PCR de miRCURY LNA miRNA o PCR de sonda de miRCURY LNA miRNA. La identificación temprana de muestras de baja calidad le ahorra tiempo y reactivos. Además, el kit es fácil de usar y viene en un formato premezclado que le permite usar solo las adiciones necesarias para sus análisis.

Actuación

Comprobación de la calidad de la muestra y la eficiencia de la PCR

Junto con el panel miRCURY LNA miRNA QC PCR, el kit RNA Spike-in para RT ofrece una forma única y completa de comprobar la calidad de las muestras y la eficiencia de la PCR. El panel es compatible con muchos tipos de muestras, incluyendo cultivos celulares, muestras de tejido y biofluidos de humanos, ratones, ratas, monos y perros (véase la figura). Los paneles miRCURY LNA miRNA QC PCR se pueden utilizar con una amplia gama de tipos de muestras. Analice su ARN aislado para detectar valores atípicos y muestras subóptimas (véase la figura). Determine los rendimientos de ARN utilizando el kit RNA Spike-in, incluyendo muestras de suero/plasma afectadas por hemólisis (véase la figura). Esto ahorra tiempo y recursos en el laboratorio.

El kit de adición de ARN también se puede utilizar para experimentos con ensayos individuales con los sistemas de PCR miRCURY LNA miRNA (para SYBR® Green) o miRCURY LNA miRNA Probe PCR. Los ensayos individuales para la plantilla de adición correspondiente están disponibles tanto en SYBR® Green como en los sistemas de PCR miRCURY LNA con sonda.

Principio

Reactivo: Cantidad
Mezcla de plantillas de ARN UniSp2, UniSp4 y UniSp5: ARN sintético UniSp2 (22 nt)
ARN sintético UniSp4 (22 nt): 1,6 fmol
ARN sintético UniSp5 (22 nt): 0,016 fmol
ARN total de MS2: 50 ng
Plantilla de ARN cel-miR-39-3p: ARN sintético cel-miR-39-3p
ARN total de MS2: 50 ng

El vial 1 contiene 3 infusiones de ARN (UniSp2, UniSp4 y UniSp5) premezcladas, cada una con una concentración diferente en incrementos de 10 veces (véase la tabla a continuación). Este conjunto de infusiones está diseñado como control de aislamiento de ARN.
El vial 2 contiene una versión sintética de cel-miR-39-3p. Este miARN está diseñado para usarse junto con el complemento UniSp6 incluido en el kit miRCURY LNA RT (denominado "complemento de ARN"). Mezclar estas plantillas de ARN, como se describe en el manual del kit, resultará en una diferencia de concentración de 100 veces entre los ARN (véase la tabla a continuación). Este conjunto de complementos está diseñado como control de la síntesis de ADNc.

Características

Utilice el kit de adición de ARN para el control de calidad de los pasos de aislamiento de ARN y síntesis de ADNc en sus experimentos de PCR de miARN miRCURY LNA o PCR de sonda de miARN miRCURY LNA. Es importante en cualquier experimento de qPCR asegurar que la calidad del ARN de entrada sea lo suficientemente alta para una amplificación eficaz. Al introducir ARN de adición durante el aislamiento de ARN y la síntesis de ADNc y comparar los resultados de la qPCR con los de los genes de referencia endógenos, puede obtener información importante sobre la calidad de sus muestras. El kit ofrece un amplio rango dinámico, ideal para controlar estos procesos (véase la figura). El kit de adición de ARN cubre todo el rango de niveles de expresión de miARN.

Cobertura del producto

Nuestras inserciones de ARN (UniSp2, UniSp4, UniSp5, UniSp6) se asemejan estructuralmente a los miARN, pero carecen de similitudes de secuencia con los miARN conocidos. El kit también incluye una versión sintética del miARN de C. elegans, cel-miR-39-3p. El kit de inserciones de ARN se distribuye en dos viales:

Cada vial contiene suficiente ARN para 50 reacciones. También incluye ARN transportador MS2, que mejora la estabilidad de las inserciones de ARN sin interferir con las reacciones posteriores.

Elige los ARN de espiga que prefieras

Para aprovechar al máximo el kit de adición de ARN, deberá adquirir los conjuntos de cebadores LNA correspondientes por separado, con la excepción de UniSp6, que se incluye en el kit de RT LNA miRCURY. Esto le brinda la flexibilidad de usar solo los conjuntos de cebadores que necesita sin tener que pagar extra por conjuntos de cebadores que no va a utilizar.

Compatibilidad

El kit RNA Spike-In es compatible con los ensayos y paneles de PCR de miRNA LNA miRCURY.

Procedimiento

Análisis e interpretación de datos

Aplicaciones

Control de calidad de los pasos de aislamiento de ARN y síntesis de ADNc de los experimentos de PCR de miRCURY LNA miRNA y PCR de sonda de miRCURY LNA miRNA