Qiagen, 37623, Kit de tejido FFPE Qproteome (20)

Para 20 preparaciones de proteínas a partir de muestras de tejido fijadas con formalina e incluidas en parafina: tampón de extracción, tubos de recolección, clips de sellado para tubos de recolección

Características

- Extracción cuantitativa estandarizada de tejido FFPE
- Proteínas de longitud completa
- Bajos requisitos de muestra

Detalles del producto

El kit de tejido FFPE Qproteome utiliza una química patentada innovadora para revertir el proceso de reticulación de la fijación de fomalina y proporcionar proteínas de longitud completa listas para su análisis posterior.

Actuación

El kit de tejido FFPE Qproteome permite una extracción eficiente de proteínas de tejido FFPE mediante un protocolo estandarizado para obtener rendimientos proteicos reproducibles (véase la figura "Extracción de proteínas estandarizada y reproducible"). Con el kit de tejido FFPE Qproteome, los rendimientos proteicos son comparables a los del material congelado, lo que permite, por ejemplo, la comparación entre diferentes tejidos para la identificación de marcadores específicos de enfermedades (véase la figura "Identificación de biomarcadores específicos de tejido").

Principio

Como método estándar para la preparación histológica de tejidos, cada año se clasifican y archivan millones de muestras fijadas en formalina e incluidas en parafina (FFPE). Anteriormente, su análisis se limitaba a técnicas histoquímicas. El kit de tejido Qproteome FFPE abre este vasto y valioso recurso al análisis proteómico y de expresión proteica, al permitir la extracción eficiente de proteínas completas, aptas para Western blot, matrices de proteínas y espectrometría de masas. Por primera vez, es posible investigar proteínas o vías de interés en tejidos FFPE archivados. El sondeo de blots o matrices con múltiples anticuerpos permite la investigación simultánea de proteínas, proporcionando una visión detallada de múltiples perfiles de expresión proteica, por ejemplo, en cascadas de transducción de señales.

La fijación con formalina crea enlaces cruzados químicos que estabilizan las muestras para el análisis histológico, pero imposibilitan cualquier separación posterior de proteínas (p. ej., mediante SDS-PAGE). El kit de tejido Qproteome FFPE utiliza una química patentada e innovadora para revertir el proceso de entrecruzamiento y proporcionar proteínas completas listas para su análisis mediante Western blot o matriz de proteínas, con inmunodetección posterior (véase la figura "Comparación de muestras de tejido FFPE a nivel de proteínas").

Procedimiento

Las secciones se desparafinan y se incuban en un tampón de extracción. Tras la centrifugación, las proteínas extraídas se recuperan en el sobrenadante. Las proteínas recuperadas pueden mezclarse directamente con el tampón de muestra y cargarse en un gel SDS-PAGE, al igual que las muestras de proteínas convencionales. No se requieren equipos costosos ni procesamiento adicional.

Para un inmunoensayo automatizado, las proteínas recuperadas se pueden cargar en un instrumento de sobremesa, Simple Western™, para un Western blot capilar sin gel, sin transferencia y con manos libres.

Aplicaciones

El kit de tejido FFPE Qproteome ofrece una herramienta única para el análisis de muestras cuyo estado patológico se ha determinado, pero cuya composición proteica precisa ha permanecido inaccesible hasta ahora. Estas muestras —por ejemplo, las obtenidas durante un tratamiento o de diferentes grupos de probandos— ofrecen una valiosa fuente de información para estudios comparativos de proteómica y biomarcadores.