Product Description
Para 50 preparaciones: Minicolumnas QIAamp, extensores de tubo (20 ml), proteinasa K QIAGEN, ARN transportador, tampones, VacConnectors y tubos de recolección (1,5 ml y 2 ml)
Características
- Concentración de ácidos nucleicos, con altos volúmenes de entrada y bajos volúmenes de elución.
- Recuperación eficiente de ADN y ARN fragmentados
- Sin extracción orgánica ni precipitación de etanol.
- Eliminación de contaminantes e inhibidores
- Se requiere colector de vacío para procesar muestras, por ejemplo, QIAvac 24 plus
Detalles del producto
El kit de ácidos nucleicos circulantes QIAamp simplifica enormemente la concentración y purificación de ADN y ARN circulantes libres del plasma o suero.
El kit se puede automatizar en QIAcube Connect.
Actuación
- PCR y PCR cuantitativa en tiempo real y RT-PCR
- Investigación y validación de biomarcadores para la detección del cáncer en sangre
- Detección de ácidos nucleicos virales
El análisis de fragmentos de ADN extracelular y ARNm específicos de tumores en sangre permite la detección específica de tipos de tumores a partir de una simple muestra de sangre. Estos ácidos nucleicos circulantes se encuentran en suero o plasma, generalmente como fragmentos cortos, de <1000 pb (ADN) o <1000 nt (ARN). Además, los miARN, de tan solo 21 nt, tienen el potencial de proporcionar biomarcadores para ciertos tipos de cáncer y enfermedades.
El kit de ácidos nucleicos circulantes QIAamp permite la purificación eficiente de estos ácidos nucleicos circulantes del plasma o suero humano y otros fluidos corporales acelulares. Esta purificación eficiente con rendimientos reproducibles proporciona una población representativa de ácidos nucleicos circulantes en sangre (véase la figura "Recuperación reproducible de ADN circulante"). Los extensores de tubo y el procesamiento al vacío del QIAvac 24 Plus permiten volúmenes de muestra iniciales de hasta 5 ml, y los volúmenes de elución flexibles de entre 20 μl y 150 μl permiten la concentración de especies de ácidos nucleicos presentes en bajas concentraciones. El kit proporciona tecnología avanzada de unión selectiva a una membrana de sílice para una mejor recuperación de ácidos nucleicos fragmentados (véase la figura "Recuperación mejorada de ADN fragmentado").
La purificación del ARN circulante, sin copurificación del ADN, es posible mediante la digestión del ADN con el kit de ADNasa sin ARNasa. Un protocolo especializado proporciona una purificación altamente eficiente de ARN pequeños, como los miARN (véase la figura "Purificación eficiente de miARN circulante"). El ADN metilado se puede purificar eficientemente con el kit de ácidos nucleicos circulantes QIAamp. El ADN purificado mantiene su metilación, lo que permite la conversión con bisulfito para el análisis del estado de metilación (véase la figura "Recuperación eficiente de ADN metilado").
El ADN y ARN circulante purificado y concentrado está libre de proteínas, nucleasas y otras impurezas, y está listo para usarse en una amplia gama de aplicaciones posteriores, que incluyen:
Principio
El kit de ácidos nucleicos circulantes QIAamp simplifica el aislamiento de ADN y ARN circulantes de plasma o suero. No requiere extracción con fenol-cloroformo. Los ácidos nucleicos se unen específicamente a la columna QIAamp Mini, mientras que los contaminantes la atraviesan. Los inhibidores de PCR, como cationes divalentes y proteínas, se eliminan completamente en tres pasos de lavado, dejando los ácidos nucleicos puros para su elución en un tampón incluido en el kit. La tecnología de ácidos nucleicos circulantes QIAamp produce ADN y ARN circulantes de plasma, suero u orina humanos.
El kit de ácidos nucleicos circulantes QIAamp combina las propiedades de unión selectiva de la membrana de sílice con volúmenes de elución flexibles de entre 20 y 150 μl. El ARN circulante se puede purificar mediante digestión de ADN utilizando el kit de ADNasa sin ARNasa.
Procedimiento
El procedimiento de ácidos nucleicos circulantes QIAamp consta de 4 pasos (lisar, unir, lavar y eluir) que se llevan a cabo utilizando columnas QIAamp Mini en un colector de vacío. Este sencillo procedimiento es ideal para el procesamiento simultáneo de múltiples muestras, proporcionando ácidos nucleicos en menos de 2 horas por cada 24 muestras. Si el kit de ácidos nucleicos circulantes QIAamp se utiliza para el aislamiento de ARN y ADN viral, no se puede garantizar el rendimiento para todas las especies de virus y debe ser validado por el usuario.
Aplicaciones
- Plasma humano
- Suero
- Orina
El kit de ácidos nucleicos circulantes QIAamp purifica y concentra eficazmente ADN, ARN, miARN y ácidos nucleicos virales circulantes a partir de materiales de partida con bajas concentraciones de ADN y ARN mayoritariamente fragmentados (normalmente entre 1 y 100 ng/ml de ADN circulante en plasma humano). Los volúmenes de muestra iniciales pueden ser de hasta 5 ml.
El kit de ácidos nucleicos circulantes QIAamp purifica y concentra ácidos nucleicos de los siguientes tipos de muestras:
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