Qiagen, 67563, Kit de ADN MagAttract HMW (48)

Para 48 preparaciones de ADN: Suspensión MagAttract G, tampón ATL, tampón AL, tampón MB, tampón MW1, tampón PE, proteinasa K, ARNasa A, tampón AE, agua libre de nucleasas

Características

- Aislamiento reproducible de ADN de alto peso molecular
- Altos rendimientos y pureza a partir de una variedad de materiales de muestra.
- Protocolos rápidos y convenientes
- Eliminación completa de inhibidores

Actuación

Parámetro: Especificación
Total de lecturas mapeadas (largas): 6521106
Tasa de error: 0,36%
Tasa de indel: 0,01%
Quimeras: 0,14%
Porcentaje de duplicación: 1,15%

El kit de ADN MagAttract HMW garantiza el aislamiento reproducible de ADN genómico >150 kb. El ADN aislado con el kit y otros procedimientos basados ​​en microesferas magnéticas se comparó mediante electroforesis en gel de campo pulsado. El kit de ADN MagAttract HMW demostró un rendimiento superior en el aislamiento de ADN de alto peso molecular (véase la figura «Aislamiento exitoso de ADN de alto peso molecular»).

Altos rendimientos y pureza constantes. El kit de ADN MagAttract HMW utiliza un procedimiento práctico y sencillo para obtener altos rendimientos de ADN puro de alto peso molecular. Las condiciones de lisis suaves minimizan la fragmentación del ADN, mientras que los contaminantes y los inhibidores de PCR se eliminan eficazmente, lo que resulta en un ADN puro de alto peso molecular. La química y el procedimiento optimizados del kit de ADN MagAttract HMW mejoran considerablemente el rendimiento y la pureza del ADN, en comparación con los métodos clásicos de columna de centrifugación o perlas magnéticas de otros proveedores (véanse las figuras "Rendimiento y pureza máximos" y "Rendimiento mejorado con diversos tipos de muestra").

Eliminación eficaz de inhibidores de PCR. Aplicaciones de alta sensibilidad, como la PCR en tiempo real o la NGS, requieren la eliminación de anticoagulantes, enzimas, cationes divalentes y otros inhibidores similares. Se realizó la amplificación por PCR en tiempo real del ADN aislado de muestras de sangre estabilizadas con EDTA, heparina y citrato utilizando el kit de ADN MagAttract HMW. No se observó inhibición en ninguna de las muestras, lo que demuestra una correlación altamente lineal entre los valores de CT y el volumen de muestra (véase la figura "Sin inhibición en muestras derivadas de sangre anticoagulada").

ADN genómico listo para la secuenciación de nueva generación. Dado que las tecnologías de secuenciación masiva paralela (MPS) utilizan longitudes de lectura cortas, la secuenciación puede realizarse con ADN genómico intacto >10 kb. Sin embargo, el ensamblaje de novo del genoma y el descubrimiento de variantes estructurales heredadas y adquiridas siguen siendo complejos con los productos estándar de purificación de ADN. Las bibliotecas de pares de apareamiento con insertos más grandes pueden tener un impacto significativo en el éxito de la secuenciación, especialmente en genomas complejos con abundantes repeticiones. El ADN genómico de alto peso molecular obtenido con el kit MagAttract HMW DNA está listo para su uso en experimentos de NGS.

Procedimiento

El conveniente protocolo MagAttract permite obtener resultados reproducibles en tan solo 70 minutos.

Protocolo rápido y optimizado. Los tampones y enzimas optimizados lisan las muestras con suavidad, garantizando al mismo tiempo una fragmentación mínima del ADN genómico. El procedimiento consta de 4 sencillos pasos: lisar, unir, lavar y eluir. Tras la lisis de la muestra, el ADN se une a la superficie de las microesferas magnéticas. Durante los pasos de lavado, se eliminan eficazmente los contaminantes y los inhibidores de PCR, y el ADN puro de alto peso molecular se eluye en el tampón AE (véase la figura del procedimiento del kit de ADN MagAttract HMW).