Qiagen, 69181, Kit DNeasy para 96 ​​plantas (6)

Para 6 minipreparaciones de ADN de 96: 6 placas DNeasy 96, tampones, reactivos, ARNasa A, bloques S, microtubos de recolección (1,2 ml), tapas, hojas de cinta AirPore

Características

- ADN puro, libre de contaminantes e inhibidores de enzimas.
- Extracción rápida de ADN listo para usar
- Sin extracción orgánica, sin precipitación de etanol.

Detalles del producto

Los kits DNeasy Plant permiten un aislamiento rápido y sencillo de ADN a partir de muestras vegetales mediante sílice en formato de columna de centrifugación. Los rendimientos típicos son de 3 a 260 μg de ADN de alta calidad, dependiendo de las muestras utilizadas (p. ej., trigo, maíz, Arabidopsis, tomate, tabaco) y la capacidad de unión de la membrana de sílice DNeasy. Los kits DNeasy Plant también permiten la purificación de ADN mediante sílice en un práctico formato de placa de 96 pocillos, con rendimientos típicos de 1 a 15 μg de ADN, según la especie vegetal. El aislamiento de ADN del tejido vegetal también se puede automatizar en QIAcube Connect.

Actuación

Abies alba (abeto plateado): Nicotiana tabacum (tabaco)
Aesculus hippocastanum (castaño de Indias): Oryza sativa (arroz) 4
Arabidopsis thaliana (berro): Pelargonium sp. (geranio) 4
Avena sp. (avena): Petunia sp. 4
Brassica napus (colza): Pinus sylvestris (pino silvestre), P. brutia 5
Brassica oleracea (colinabo): Populus tremula (álamo temblón)
Chicorium endivia (achicoria): Pseudotsuga menziesii (abeto de Douglas)
Citrullini lanatus (sandía): Quercus robur, Q. petrea (roble) 6,7
Egeria sp.: Rododendro sp. 2,4
Fagus sylvatica (haya) 1: Rubus idaeus (frambuesa)
Helianthus spp. (girasol): Solanum tuberosum (patata)
Hordeum vulgare (cebada) 2: Sphagnum palustre (musgo)
Humulus sp. (lúpulo): Spinacia oleracea (espinaca)
Hydrilla sp.: Taxus baccata (tejo)
Kalanchoe spp.: Triticum aestivum (trigo) 4
Lupinus sp.: Ulmus glabra (olmo) 6
Lycopersicon esculentum (tomate) 3: Vitis spp. (uva) 6
Myriophyllum sp.: Zea mays (maíz)

Los kits DNeasy Plant permiten el aislamiento rápido y eficiente de ADN de alta calidad de una amplia variedad de especies vegetales y tipos de tejidos, incluyendo las fuentes más exigentes (véase la tabla "Selección de especies vegetales procesadas con los kits DNeasy"). Las muestras pueden ser frescas, congeladas o secas. El procedimiento optimizado de DNeasy Plant incorpora la columna de centrifugación QIAshredder, una columna única de filtración y homogeneización que elimina eficazmente los restos celulares y mejora la manipulación de las muestras tras la lisis.

Selección de especies vegetales procesadas con los Kits DNeasy

El rendimiento típico es de 3 a 260 μg, con un tamaño de muestra de hasta 1 g de peso húmedo y un volumen de elución de 50 μl a 2 ml. El rendimiento de ADN varía entre diferentes especies y tejidos en función del tamaño del genoma, la ploidía, el número de células y la edad de la muestra de tejido.

El procedimiento DNeasy Plant produce ácido nucleico puro, libre de polisacáridos y otros metabolitos secundarios, a menudo copurificados mediante métodos convencionales. Estas impurezas pueden interferir con las lecturas espectrofotométricas e inhibir las reacciones enzimáticas. Los análisis de absorbancia del ADN purificado con DNeasy muestran un pico simétrico a 260 nm (véanse las figuras "Pureza del ADN de hojas de roble y agujas de pino"), lo que confirma que el ADN está libre de impurezas, incluidos inhibidores enzimáticos. El ADN purificado con DNeasy tiene un tamaño de hasta 40 kb (véase la figura "ADN puro (20-25 kb) para análisis de restricción"). El ADN purificado se puede utilizar en una amplia gama de aplicaciones (véanse las figuras "Análisis por PCR" y "Análisis por RAPD").

Principio

Los kits para plantas DNeasy utilizan tecnología avanzada de membrana de sílice y sencillos procedimientos de centrifugación para aislar ADN celular total de alta pureza de tejidos y células vegetales u hongos. La tecnología DNeasy sustituye los engorrosos procedimientos de aislamiento de ADN, como la extracción con CTAB, fenol o cloroformo. Además, no es necesaria la precipitación con alcohol, ya que el ADN purificado está listo para su uso inmediato.

Procedimiento

Las muestras se rompen primero mecánicamente y luego se lisan químicamente (véase el diagrama de flujo "Procedimientos de DNeasy Plant y DNeasy 96 Plant"). El ARN se elimina mediante digestión con ARNasa durante la lisis. Se eliminan los restos celulares, las proteínas precipitadas y los polisacáridos, y la muestra se homogeneiza mediante centrifugación en una columna de centrifugación QIAshredder. Se ajustan las condiciones de tampón y el lisado se carga en la columna de centrifugación DNeasy Plant Mini. Durante un breve centrifugado, el ADN se une selectivamente a la membrana de sílice mientras los contaminantes la atraviesan. Los contaminantes restantes y los inhibidores enzimáticos se eliminan en uno o dos lavados eficientes. A continuación, el ADN puro se eluye en agua o tampón bajo en sal, listo para su uso.

Aplicaciones

- Extracción de ADN de plantas y microorganismos asociados a ellas.
- Análisis PCR y NGS
- Cría asistida por marcadores
- Investigación sobre patógenos vegetales
- Estudios sobre plantas modificadas genéticamente
- Detección de rasgos de resistencia

Los kits DNeasy Plant permiten la purificación de ADN listo para usar a partir de muestras de plantas, incluyendo células, tejidos y hongos. El kit DNeasy Plant está diseñado para: