Qiagen, 69204, Kit DNeasy Plant Pro (50)

Tubos de disrupción de tejido, columnas de centrifugación MB, tampones, tubos de recolección (1,5 y 2 ml), para 50 preparaciones

Características

- Rendimiento de PCR superior con tecnología patentada de eliminación de inhibidores (IRT)
- Extracción rápida de ADN listo para usar
- Sin extracción orgánica, sin precipitación de etanol.
- Lisis y liberación altamente eficientes de ADN de materiales vegetales resistentes y patógenos vegetales asociados.

Detalles del producto

El kit DNeasy Plant Pro cuenta con diversas características innovadoras para superar los desafíos de la extracción de ADN del tejido vegetal y permitir la recuperación de ADN de alta calidad de los tipos de muestras más resistentes, como hojas de fresa, hojas de vid, agujas de pino y diversos tipos de semillas. El aumento de la producción de ADN vegetal y de patógenos vegetales, junto con una eliminación superior de inhibidores, garantiza resultados de alto rendimiento en aplicaciones posteriores sensibles.

Actuación

Abies alba (abeto plateado): Nicotiana tabacum (tabaco)
Aesculus hippocastanum (castaño de Indias): Oryza sativa (arroz) 4
Arabidopsis thaliana (berro): Pelargonium sp. (geranio) 4
Avena sp. (avena): Petunia sp. 4
Brassica napus (colza): Pinus sylvestris (pino silvestre), P. brutia 5
Brassica oleracea (colinabo): Populus tremula (álamo temblón)
Chicorium endivia (achicoria): Pseudotsuga menziesii (abeto de Douglas)
Citrullini lanatus (sandía): Quercus robur, Q. petrea (roble) 6,7
Egeria sp.: Rododendro sp. 2,4
Fagus sylvatica (haya) 1: Rubus idaeus (frambuesa)
Helianthus spp. (girasol): Solanum tuberosum (patata)
Hordeum vulgare (cebada) 2: Sphagnum palustre (musgo)
Humulus sp. (lúpulo): Spinacia oleracea (espinaca)
Hydrilla sp.: Taxus baccata (tejo)
Kalanchoe spp.: Triticum aestivum (trigo) 4
Lupinus sp.: Ulmus glabra (olmo) 6
Lycopersicon esculentum (tomate) 3: Vitis spp. (uva) 6
Myriophyllum sp.: Zea mays (maíz)

El kit DNeasy Plant Pro, el miembro más reciente de la prestigiosa familia DNeasy Plant, permite la purificación de ADN con una producción significativamente mayor a partir de los tipos de muestra más resistentes, como hojas de fresa, hojas de vid, agujas de pino y diversos tipos de semillas (véase la tabla "Selección de especies de plantas procesadas con los kits DNeasy" y la figura "Producción significativamente mayor de ADN puro"). La tecnología patentada de eliminación de inhibidores (IRT) proporciona una eliminación superior de inhibidores sin utilizar productos químicos agresivos, lo que produce ADN puro con menor inhibición de la PCR (véase la figura "Eliminación eficiente de inhibidores de la PCR").

Cuando se compararon los valores de CT de las reacciones de PCR con eluidos de ADN vegetal que contenían posibles inhibidores con los valores de CT de la reacción de PCR con agua añadida como control, que no inhibe la amplificación del ADN IC, el eluido del kit DNeasy Plant Pro no mostró inhibición.

Con el kit DNeasy Plant Pro, la producción de ADN purificado de hoja de fresa (una muestra de planta particularmente resistente) fue significativamente mayor que la obtenida con un kit de los proveedores T y Z. Además, el kit DNeasy Plant Pro proporcionó una eliminación superior de inhibidores y el eluido de ADN no mostró inhibición (véase la figura "Producción significativamente mayor y eliminación superior de inhibidores"). El kit DNeasy Plant Pro también puede purificar ADN bacteriano, fúngico y viral de muestras de plantas y raíces.

El kit puede combinarse con éxito en un flujo de trabajo con productos probados y optimizados para la secuenciación de nueva generación (NGS) (véase la figura "Flujo de trabajo NGS optimizado"). La identificación rápida y fiable de patógenos vegetales es crucial para evitar la propagación de enfermedades y facilitar su gestión eficaz. El ADN de plantas y patógenos, copurificado con el kit DNeasy Plant Pro, permite la identificación eficaz de diversos patógenos (véase la figura "Identificación eficaz de patógenos vegetales mediante NGS").

Principio

El kit DNeasy Plant Pro incluye un método novedoso y patentado para la purificación rápida y sencilla del ADN celular total de células, tejidos y semillas vegetales. Además, este kit puede utilizarse para purificar ADN bacteriano, fúngico y viral de muestras de plantas y raíces. El kit DNeasy Plant Pro utiliza tecnología de microesferas, que sustituye los engorrosos procedimientos de aislamiento de ADN, como la extracción con CTAB, fenol o cloroformo, para recuperar ADN de alta calidad de las muestras más resistentes, como hojas de fresa, hojas de vid, agujas de pino y diversos tipos de semillas. El kit DNeasy Plant Pro utiliza la segunda generación de la Tecnología de Eliminación de Inhibidores (IRT) patentada por QIAGEN para eliminar los inhibidores de PCR, como polisacáridos, polifenoles y otros metabolitos secundarios, de los extractos vegetales durante el proceso de aislamiento. La IRT mejorada, combinada con un batido de perlas eficiente y una química de lisis, da como resultado altos rendimientos de ADN libre de inhibidores que está listo para su uso inmediato en aplicaciones posteriores, incluido el análisis de PCR, qPCR y RAPD, el análisis de RFLP, el Southern blotting y la secuenciación de próxima generación.

Procedimiento

El kit DNeasy Plan Pro utiliza tecnología de microesferas, que reemplaza los engorrosos procedimientos de aislamiento de ADN para recuperar ADN de alta calidad de las muestras más difíciles. Las muestras se añaden al tubo de disrupción tisular, que contiene una microesfera con una forma especial y un tampón para una rápida homogeneización (véase la figura "Homogeneización rápida en tubos de disrupción tisular"). La lisis celular y la liberación del ADN se producen mediante métodos mecánicos y químicos. El ADN genómico liberado se elimina de los inhibidores de PCR mediante la Tecnología de Eliminación de Inhibidores (IRT) de segunda generación de QIAGEN y, a continuación, se captura en una membrana de sílice en una columna de centrifugación. A continuación, el ADN se lava y se eluye de la membrana, quedando listo para PCR, qPCR, NGS y otras aplicaciones posteriores.

Un paso opcional de solución de separación fenólica ayuda a obtener ADN puro incluso en muestras con alto contenido de compuestos polifenólicos, como hojas de pino o de parra, al romper los enlaces entre el ADN y los fenólicos. Este paso evita la pérdida de ADN que, de otro modo, se produciría en estas muestras.

El kit DNeasy Plant Pro se utiliza con un vórtex o un agitador de perlas de alta velocidad, según las necesidades de la muestra. Los métodos de vórtex funcionan con tejido foliar blando. Los agitadores de perlas de alta velocidad, como el homogeneizador PowerLyzer 24 o el TissueLyser II, descomponen material vegetal más resistente, como raíces, semillas, tallos o tejidos foliares complejos. Además, la purificación de ADN con el kit DNeasy Plant Pro se puede automatizar completamente en el QIAcube Connect.

Aplicaciones

- Extracción de ADN de plantas y microorganismos asociados a ellas.
- Análisis PCR y NGS
- Cría asistida por marcadores
- Investigación sobre patógenos vegetales
- Estudios sobre plantas modificadas genéticamente
- Detección de rasgos de resistencia

Los kits DNeasy Plant permiten la purificación de ADN listo para usar a partir de muestras de plantas, incluyendo células, tejidos y hongos. El kit DNeasy Plant Pro está diseñado para: