Qiagen, 69514, Kit de alimentos DNeasy mericon (50)

50 columnas de centrifugación QIAquick, proteinasa K, tampones

Características

- Extracción de ácidos nucleicos de alta calidad a partir de una variedad de materiales de partida
- Mínimo arrastre de inhibidores de PCR
- ADN aislado y puro adecuado para aplicaciones de PCR en tiempo real

Detalles del producto

Los kits de preparación de muestras mericon están diseñados para permitir la extracción de ácidos nucleicos de alta calidad a partir de una amplia gama de materiales de partida, como cultivos de enriquecimiento de patógenos (kits mericon DNA Bacteria y Bacteria Plus) y diversos alimentos crudos y procesados ​​(kit DNeasy mericon Food). Se minimiza la transferencia de inhibidores de PCR de estas complejas matrices alimentarias. El ADN aislado y puro es adecuado para aplicaciones posteriores, como la autenticación de ingredientes mediante PCR en tiempo real, la detección de patógenos o la detección y cuantificación de ADN de OGM mediante los kits de ensayo de PCR mericon.

Actuación

Kit de comida DNeasy mericon

Durante la producción, los alimentos se someten a calor, irradiación, alta presión y cambios de pH, lo que provoca la degradación y fragmentación del ADN. La química optimizada del kit DNeasy mericon Food se desarrolló para recuperar fragmentos cortos de ADN (de hasta 100 pb), lo que garantiza que incluso el ADN altamente fragmentado se aísle eficazmente y se amplifique posteriormente en reacciones de PCR. Gracias a estas características, este kit ofrece un método de extracción universal que genera resultados óptimos y fiables incluso con alimentos altamente procesados, grasos o ácidos, o con alimentos con alto o bajo contenido de ADN o alto contenido de inhibidores (véanse las figuras "Altos rendimientos de ADN con mínima carga de inhibidores").

Kits de bacterias de ADN mericon y bacterias de ADN Plus

El procedimiento de lisis térmica que utiliza el kit mericon DNA Bacteria está optimizado para la mayoría de las bacterias gramnegativas de fácil lisis (por ejemplo, Salmonella spp., Camplylobacter spp. y Cronobacter spp.), mientras que las características avanzadas de la preparación mecánica de muestras utilizando el kit mericon DNA Bacteria Plus crean las condiciones de lisis necesarias para bacterias grampositivas difíciles, como Listeria spp. (consulte la Figura "Extracción eficiente de ADN de bacterias gramnegativas o grampositivas").

Principio

Kit de comida DNeasy mericon

Este kit utiliza una extracción mejorada de ácidos nucleicos celulares totales con bromuro de cetiltrimetilamonio (CTAB). El detergente no iónico CTAB se utiliza ampliamente para la extracción eficiente de ácidos nucleicos celulares totales de una amplia gama de tipos de tejidos. Dependiendo de las condiciones salinas, el CTAB puede formar complejos con ácidos nucleicos celulares (bajas en sal) o con inhibidores celulares, como polisacáridos, proteínas y metabolitos vegetales (altas en sal; como los presentes en el tampón de lisis de alimentos).

Con menos pasos de flujo de trabajo que los protocolos CTAB convencionales, se pueden procesar hasta 30 muestras en 2,5 horas con el kit de alimentos DNeasy mericon (consulte la figura "Extracción de ADN rápida y eficiente").

El protocolo optimizado utiliza CTAB en combinación con proteinasa K para digerir tejido compacto y posteriormente precipitar proteínas con precipitación simultánea de otros inhibidores celulares y derivados de alimentos.

Los inhibidores se precipitan por centrifugación, mientras que el ADN extraído permanece en solución. En la posterior extracción con cloroformo, cualquier residuo de CTAB-proteína, CTAB-residuo o complejo CTAB-polisacárido no precipitado se elimina junto con otros inhibidores lipofílicos mediante extracción en la fase orgánica de cloroformo. Solo la fase acuosa, que contiene el ADN y los inhibidores significativamente reducidos, se procesa posteriormente. Esta fase se mezcla con tampón de unión (para ajustar las condiciones de unión) y se aplica a las columnas QIAquick Spin. El ADN resultante está listo para su uso inmediato en un ensayo de PCR en tiempo real con mericon.

Kit de bacterias de ADN mericon y kit de bacterias de ADN mericon Plus

Hasta la fecha, el método predominante para analizar alimentos en busca de patógenos ha sido la preparación de cultivos o ensayos ELISA. Los métodos moleculares, en concreto la PCR en tiempo real, ofrecen un complemento informativo a estos métodos consolidados.

El protocolo de lisis térmica del kit mericon DNA Bacteria está optimizado para la mayoría de las bacterias gramnegativas de fácil lisis (p. ej., Salmonella spp., Campylobacter spp. y Cronobacter spp.). El protocolo de lisis mecánica del kit mericon DNA Bacteria Plus crea las condiciones adecuadas para la extracción bacteriana de bacterias grampositivas, como Listeria spp.

La química cuidadosamente formulada incluida en el kit mericon DNA Bacteria y el kit mericon DNA Bacteria Plus maximiza la eficiencia de la lisis, estabiliza el ADN extraído y elimina los inhibidores que pueden interferir con aplicaciones posteriores.

Procedimiento

Kit de comida DNeasy mericon

El ADN se extrae de una muestra de alimento homogeneizada mediante un protocolo sencillo que elimina los inhibidores y produce ADN puro que es adecuado para aplicaciones posteriores, como la autenticación de ingredientes mediante PCR en tiempo real o la detección de OGM.

Kit de bacterias de ADN mericon y kit de bacterias de ADN mericon Plus

El ADN bacteriano se extrae de un cultivo de enriquecimiento bacteriano mediante un protocolo basado en lisis mecánica (con microesferas) o lisis térmica (por ebullición). Ambos protocolos producen una suspensión de ADN bacteriano adecuada para la detección de patógenos mediante PCR en tiempo real.

Aplicaciones

El kit de alimentos DNeasy mericon sirve para aislar ADN de alimentos crudos o procesados ​​para aplicaciones posteriores, como la autenticación de ingredientes.

Los kits mericon Bacteria y Bacteria Plus están destinados al aislamiento de ADN bacteriano a partir de cultivos de enriquecimiento de alimentos y piensos.