Qiagen, 763134, Kit de miRNA de sangre PAXgene (50) icono_0368_ls_gen_ecológico-s

Para 50 preparaciones de ARN: columnas de centrifugación PAXgene, columnas de centrifugación PAXgene Shredder, tubos de procesamiento, tubos de microcentrífuga, DNasa sin ARNasa, reactivos y tampones sin ARNasa; para usar junto con los tubos de ARN sanguíneo PAXgene

Características

- Aislamiento efectivo de ARN intracelular, incluido miARN
- Procesamiento estandarizado de muestras antes del análisis
- Tratamiento integrado con DNasa para la eliminación de ADNg
- El aislamiento se puede automatizar en los instrumentos QIAcube

Detalles del producto

El sistema PAXgene Blood miRNA consta del kit PAXgene Blood miRNA para la purificación de ARN total, incluyendo ARN de más de 18 nucleótidos, y tubos PAXgene Blood RNA (disponibles en BD, n.º de cat. 762165) para la recolección, estabilización y transporte de sangre. La purificación se realiza mediante tecnología de purificación de ARN basada en sílice en formato de columna de centrifugación. La purificación puede realizarse manualmente, mediante una microcentrífuga, o automatizada en QIAcube Connect. Junto con los tubos, el kit proporciona una solución preanalítica completa para la recolección, estabilización y purificación de ARN total de alta calidad, incluyendo miRNA, para análisis molecular.

Actuación

Los protocolos del kit PAXgene Blood miRNA proporcionan condiciones óptimas de unión para diversas especies de ARN. El ARN total aislado incluye moléculas de ARNm y ARN menores de 200 nucleótidos, como ARNr 5.8S, ARNr 5S, ARNt y miARN (véase la figura "Altos rendimientos de especies de ARN pequeñas"). La química del kit PAXgene Blood miRNA se adapta a diversas aplicaciones posteriores, incluidas las tecnologías de PCR de QIAGEN. El miARN de alta calidad obtenido puede analizarse con el sistema QIAGEN miScript PCR* (véase la figura "Análisis de especies de miARN") o el sistema miRCURY LNA miRNA Probe PCR (véase la figura "Análisis de miARN mediante ensayos de PCR miRCURY LNA miRNA Probe con el sistema miRCURY LNA miRNA Probe PCR").

*Este producto está descontinuado y es posible que no esté disponible para su compra en su región.

Principio

El número de copias de cada especie de ARN en sangre puede variar significativamente durante el almacenamiento o el transporte a temperatura ambiente, lo que dificulta la realización de estudios fiables de la expresión génica. Tanto la estabilización de las moléculas de ARN tras la extracción como un protocolo eficiente de aislamiento de ARN son necesarios para maximizar la comprensión de los perfiles de expresión de la sangre completa. Basado en tecnología probada de membrana de sílice en un formato de columna de centrifugación fiable, y en combinación con los tubos PAXgene Blood RNA, el kit PAXgene Blood miRNA proporciona la química y el procedimiento rápido para aislar ARN total y miRNA de alta calidad.

Procedimiento

La lisis celular y la estabilización del ARN intracelular se producen tras la recolección de sangre completa en tubos PAXgene Blood RNA, lo que previene eficazmente cambios en los perfiles de expresión génica mediante regulación génica ex vivo o degradación del ARN. Tras la eliminación de los restos celulares, los tampones del kit proporcionan las condiciones óptimas para que las moléculas de ARN se unan a la membrana de sílice. Los contaminantes se eliminan mediante lavado y las trazas de ADN se eliminan mediante tratamiento con DNasa I. El ARN puro, incluido el miARN, se eluye en un tampón de elución bajo en sal y se desnaturaliza mediante calor (véase la figura "Procedimiento de miARN PAXgene Blood").

Aplicaciones

- síntesis de ADNc
- Matrices de expresión genética
- RT-PCR de punto final
- RT-PCR cuantitativa, incluida la tecnología TaqMan
- Secuenciación de próxima generación

El ARN aislado está listo para usarse en una amplia gama de aplicaciones posteriores, que incluyen: