Qiagen, 80004, AllPrep ADN/ARN/Proteína Mini Kit (50)

Para 50 preparaciones: columnas de centrifugación de ADN AllPrep, columnas de centrifugación RNeasy, tubos de recolección, reactivos y tampones sin ARNasa

Características

- Recuperación máxima de cada analito de muestras valiosas
- Ahorro de tiempo gracias a un flujo de trabajo corto y optimizado
- Datos comparables ya que los analitos provienen de la misma muestra
- No necesita disolventes orgánicos como fenol y acetona.

Detalles del producto

El minikit AllPrep de ADN/ARN/Proteína permite la purificación simultánea de ADN, ARN y proteínas de la misma célula o muestra de tejido. El kit puede utilizarse en combinación con el reactivo tisular Allprotect, que proporciona una estabilización inmediata del ADN, ARN y proteínas en muestras de tejido para su almacenamiento a largo plazo sin necesidad de congelación. Los tejidos pueden desintegrarse eficazmente con un sistema TissueRuptor o TissueLyser.

Principio

El minikit AllPrep de ADN/ARN/Proteína estandariza la preparación de muestras para biología de sistemas. El ADN, el ARN y las proteínas se preparan a partir de la misma fuente, eliminando la variación inherente a la preparación de estos analitos a partir de diferentes muestras. No es necesario dividir la muestra en tres partes antes de la purificación, lo que permite una máxima recuperación de ADN, ARN y proteínas. Además, no se requieren disolventes orgánicos como fenol y acetona.

Procedimiento

Las células o tejidos se lisan y homogeneizan primero en el tampón RLT, que inactiva inmediatamente las DNasas, las RNasas y las proteasas para garantizar el aislamiento de ADN, ARN y proteínas intactos. A continuación, el lisado se pasa a través de una columna de centrifugación de ADN AllPrep. Esta columna, en combinación con el tampón de alta concentración salina, permite la unión selectiva y eficiente del ADN genómico. La columna se lava y se eluye el ADN puro, listo para usar.

Se añade etanol al flujo de la columna de centrifugación de ADN AllPrep para proporcionar las condiciones de unión adecuadas para el ARN. A continuación, la muestra se aplica a una columna de centrifugación RNeasy, donde el ARN total se une a la membrana y los contaminantes se eliminan eficazmente. El ARN de alta calidad se eluye en agua sin ARNasas.

El tampón APP, una novedosa solución acuosa de precipitación de proteínas, se añade al flujo de la columna de centrifugación RNeasy y las proteínas precipitadas se sedimentan mediante centrifugación. Las proteínas totales intactas se redisuelven en un tampón adecuado y quedan listas para su uso en aplicaciones posteriores. El kit incluye el tampón ALO, compatible con SDS-PAGE, para disolver el sedimento de proteínas. (Consulte el diagrama de flujo "Procedimiento AllPrep ADN/ARN/Proteína").

Aplicaciones

- Análisis de PCR en tiempo real
- Análisis RT-PCR en tiempo real

El minikit AllPrep de ADN/ARN/Proteína agiliza la preparación de muestras al permitir la purificación simultánea de ADN genómico, ARN total y proteína total de la misma muestra celular o tisular. La proteína total purificada con este kit es apta para SDS-PAGE y Western blot. El ADN genómico y el ARN total purificados con el minikit AllPrep de ADN/ARN/Proteína ofrecen resultados óptimos en todas las aplicaciones posteriores, incluyendo: