Qiagen, 80254, Kits de ADN/ARN AllPrep PowerFecal Pro

Para 50 preparaciones: 50 tubos PowerBead Pro, 50 columnas de centrifugación MB, 50 columnas de centrifugación de ARN MB, 150 tubos de recolección (2 ml), 100 tubos de elución (1,5 ml), 100 tubos de microcentrífuga (2 ml), agua sin ARNasa, reactivos y tampones.

Características

- Tecnología de eliminación de inhibidores (IRT) mejorada de segunda generación
- Separa el ARN y el ADN de la misma muestra en diferentes eluatos en un solo procedimiento
- Lisis optimizada para aumentar la producción de ADN y ARN.
- ARN y ADN para análisis metagenómico y metatranscriptómico

Detalles del producto

Con el kit AllPrep PowerFecal Pro de ADN/ARN, puede extraer ADN y ARN de la misma muestra de heces o intestino mediante un protocolo patentado con Tecnología de Eliminación de Inhibidores (IRT) mejorada. La IRT de segunda generación es eficaz con muestras que contienen sustancias inhibidoras, como polisacáridos, hemocompuestos y sales biliares, que se encuentran comúnmente en las heces. Una química de lisis optimizada, combinada con la tecnología de microesferas, permite obtener altos rendimientos de ADN y ARN de alta calidad que pueden utilizarse inmediatamente en aplicaciones posteriores, como PCR, RT-PCR, qPCR y secuenciación de nueva generación (NGS) (16S, metagenoma y metatranscriptoma).

Si desea obtener más información sobre nuestra solución completa de estabilización y extracción, visite la página web del kit PowerProtect DNA/RNA.

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Actuación

El kit AllPrep PowerFecal Pro DNA/RNA permite un alto rendimiento de ácidos nucleicos de alta pureza extraídos simultáneamente de la misma muestra de heces (ver figuras Rendimientos de ARN - Cuantificación QIAexpert, Rendimientos de ADN - Cuantificación QIAexpert, Relación calidad de ARN 260/280, Relación calidad de ARN 260/230, Relación calidad de ADN 260/280, Relación calidad de ADN 260/230). El kit purifica eficientemente ADN y ARN de muestras de heces que son inherentemente ricas en inhibidores de PCR debido al buen agotamiento de inhibidores (ver figura Calidad de ARN - Inhibición de PCR). El kit permite altos rendimientos de ARN de alta calidad (ver figuras Valor RIN, Relación 23S/16S). El ADN y el ARN son adecuados para análisis NGS como análisis de unidad taxonómica operativa (OTU) microbiana o estudios metagenómicos y metatranscriptómicos comparativos (ver figura Unidades taxonómicas operativas). Se demuestra una abundancia microbiana completa (ver figuras Diversidad Alfa y Diversidad Beta).

Principio

El kit AllPrep PowerFecal Pro DNA/RNA está diseñado para purificar simultáneamente ADN y ARN microbianos de muestras de heces. Los ácidos nucleicos se obtienen de toda la muestra durante el mismo proceso (véase la figura "Procedimiento AllPrep PowerFecal Pro DNA/RNA"). El kit AllPrep PowerFecal Pro DNA/RNA integra tres tecnologías de QIAGEN para una extracción eficaz de ADN y ARN: IRT en la lisis inicial, unión selectiva de ADN bicatenario y tecnología RNeasy® para el aislamiento de ARN con mínima copurificación.

Para proteger la integridad de los ácidos nucleicos, le recomendamos conservar su muestra de heces lo antes posible después de la recolección. Con PowerProtect DNA/RNA para almacenamiento y estabilización, ofrecemos una solución integral (véase la figura "Estabilización de muestras y extracción de ADN/RNA"), desde la recolección hasta la extracción.

Procedimiento

Recomendamos comenzar con 50–200 mg de heces. Homogeneice cada muestra en un tubo de microesferas de 2 ml con una mezcla de microesferas de lisis. La combinación de microesferas mecánicas y una química de lisis probada facilita la lisis optimizada de las células huésped y microbianas. Elimine los inhibidores comunes presentes en las muestras de heces que interfieren con la PCR y otras aplicaciones posteriores mediante la IRT de segunda generación. Pase el lisado a través de una columna de centrifugación MB junto con un tampón de alto contenido salino para permitir una unión selectiva y eficiente del ADN genómico. Lave y eluya el ADN. Está listo para el análisis por PCR y otras aplicaciones posteriores, como la qPCR y la NGS.

Añada etanol al flujo de la columna de centrifugación MB para crear las condiciones adecuadas para la unión del ARN. Transfiera la muestra a una columna de centrifugación de ARN MB para asegurar la unión total del ARN a la membrana. Lave y eluya el ARN en agua sin ARNasa. Ahora está listo para aplicaciones posteriores, como RT-PCR, qPCR y NGS.

Almacenamiento, estabilización y conservación de muestras. El tiempo transcurrido entre la toma de la muestra y su conservación es uno de los factores principales que influyen en el rendimiento y la integridad de los ácidos nucleicos aislados de microbios en muestras de heces, junto con el estado del sistema digestivo y la dieta del individuo. Recomendamos procesar la muestra lo antes posible tras la toma para optimizar la calidad de los ácidos nucleicos de las heces. El reactivo PowerProtect ADN/ARN permite estabilizar las muestras de heces a temperatura ambiente.

Aplicaciones

El kit AllPrep PowerFecal Pro de ADN/ARN permite la extracción simultánea de ADN y ARN de alta calidad. El ADN puede utilizarse inmediatamente en análisis de PCR y otras aplicaciones posteriores, como qPCR y NGS. El ARN puede utilizarse en aplicaciones posteriores, como RT-PCR, qPCR, PCR digital y secuenciación de nueva generación (p. ej., RNA-seq o metatranscriptoma).