Qiagen, 80311, Kit AllPrep de ADN/ARN 96 (4)

Para preparaciones de 4 x 96: 4 placas de ADN AllPrep 96, 4 placas RNeasy 96, microtubos de elución CL, tapas, bloques S, hojas de cinta AirPore, reactivos y tampones sin ARNasa

Características

- ADN y ARN de alta calidad de la misma muestra
- Rendimiento máximo de ADN y ARN a partir de muestras valiosas
- Purificación rápida con un protocolo corto y optimizado
- Protocolos optimizados para placas de 96 pocillos
- ADN y ARN listos para usar para cualquier análisis posterior

Detalles del producto

Los kits AllPrep de ADN/ARN permiten la purificación simultánea del ADN genómico y el ARN total de cada muestra celular o tisular. Al no ser necesario dividir cada muestra en dos para procedimientos de purificación separados, se pueden obtener rendimientos máximos de ADN y ARN. El ADN y el ARN purificados se eluyen por separado.

Los kits AllPrep DNA/RNA Micro y Mini se pueden automatizar en QIAcube Connect. El kit AllPrep DNA/RNA 96 es ideal para la purificación de alto rendimiento de ADN genómico y ARN total de hasta 96 muestras.

Actuación

Tejido (5 mg): Rendimiento de ADN (µg)*
Corazón: 3,89
Cerebro: 2.60
Riñón: 11.33
Hígado: 32,40
Pulmón: 9,65
Bazo: 20,50
Timo: 34,90
Intestino: 26,71

Tejido de rata: valor RIN*
Hígado: 9,4
Pulmón: 9.5
Bazo: 9.6
Timo: 10.0

Se pueden procesar pequeñas muestras de células cultivadas y tejidos fáciles de lisar con la tecnología AllPrep ADN/ARN (véase la tabla "Rendimiento óptimo de ADN y ARN de tejidos con el kit AllPrep ADN/ARN Micro"). El ADN genómico se purifica con la novedosa columna de centrifugación AllPrep DNA, y el ARN total se purifica con una columna de centrifugación RNeasy MinElute. El ARN total con valores RIN de Agilent cercanos a 10 se obtiene rutinariamente de células cultivadas. El ADN genómico y el ARN total muestran una cuantificación fiable en un amplio rango dinámico (véase la figura "Amplio rango dinámico").

Rendimiento óptimo de ADN y ARN a partir de tejidos utilizando el AllPrep DNA/RNA Micro Kit

Un flujo de trabajo sencillo permite la extracción de ADN y ARN de una sola muestra. El ADN genómico purificado tiene una longitud promedio de 15-30 kb y presenta un buen rendimiento en PCR multiplex (véase la figura "PCR multiplex de 8 dianas"). El ARN total es de alta calidad y presenta un valor RIN de 10, lo que indica que está intacto (véanse las figuras "Purificación simultánea de ARN total y ADN genómico" y "ARN total de alta calidad").

La tecnología AllPrep DNA/RNA también permite una purificación eficiente de ADN y ARN de alta calidad de diferentes tipos de células y tejidos en un cómodo formato de 96 pocillos (consulte la tabla “ARN de alta calidad de tejidos purificado utilizando el kit AllPrep DNA/RNA 96” y la figura “Purificación reproducible de ADN y ARN en formato de 96 pocillos”).

ARN de alta calidad de tejidos purificados utilizando el kit AllPrep DNA/RNA 96

No es necesaria ninguna digestión adicional con ARNasa o ADNasa (ver figura "ARN sin contaminación de ADN genómico") y el ADN purificado es adecuado para aplicaciones posteriores (ver figura "ADN de alta calidad para un análisis de PCR multiplex confiable").

Principio

- Fabricación
- Gestión responsable de productos químicos
- Contenido sostenible en productos y materiales de embalaje
- Eliminación del embalaje al final de su vida útil

Los kits AllPrep de ADN/ARN están diseñados para purificar ADN genómico y ARN total de la misma muestra celular o tisular. Al no ser necesario dividir la muestra en dos para procedimientos de purificación independientes, se pueden obtener rendimientos máximos de ADN y ARN. La purificación eficiente de ADN y ARN de alta calidad de diferentes tipos de tejido se logra sin necesidad de digestión adicional con ARNasa o ADNasa. El ADN y el ARN purificados se eluyen por separado y están listos para usar en cualquier aplicación posterior. El procesamiento en formato de 96 pocillos convierte a la tecnología AllPrep de ADN/ARN en la herramienta ideal para la preparación de muestras en genómica y biología de sistemas.

Para una alternativa más sostenible, contamos con el minikit QIAwave DNA/RNA. Este kit reduce el uso de plástico y cartón hasta en un 52 % y un 58 %, respectivamente, en comparación con el minikit AllPrep DNA/RNA. Incluye tubos de desecho fabricados con plástico 100 % reciclado, que pueden reutilizarse durante el procedimiento. Los tampones QIAwave, en formato concentrado, reducen el consumo de plástico hasta en un 90 % por frasco. A pesar de la diferencia visual, el kit QIAwave mantiene su facilidad de uso con una composición química y un rendimiento idénticos a los del kit estándar.

En colaboración con My Green Lab, también evaluamos el impacto ambiental del minikit AllPrep DNA/RNA (50) y del minikit QIAwave DNA/RNA (50). Las etiquetas de impacto ambiental ACT de My Green Lab buscan evaluar y calificar los productos según diversos criterios de sostenibilidad, entre ellos:

Los productos se puntúan del 1 al 10, excepto el consumo de energía y agua, que se puntúan con 1 punto por kWh o galón, respectivamente. Una puntuación baja significa un menor impacto ambiental (véanse las figuras "Etiqueta del factor de impacto ambiental de los minikits de ADN/ARN (50) en EE. UU., UE y Reino Unido").

Procedimiento

Un sencillo flujo de trabajo en columna de centrifugación permite la purificación de ADN y ARN de alta calidad a partir de la misma muestra (véase el diagrama de flujo "Procedimiento AllPrep ADN/ARN"). Se pueden procesar tanto células cultivadas como tejidos fáciles de lisar. El ADN genómico se purifica con la novedosa columna de centrifugación AllPrep ADN, y el ARN total se purifica con una columna de centrifugación RNeasy Mini o RNeasy MinElute (Kit AllPrep ADN/ARN Micro).

Al romper y homogeneizar tejidos con el tampón RLT Plus (suministrado con los kits AllPrep DNA/RNA Micro y AllPrep DNA/RNA Mini), puede producirse una formación excesiva de espuma (tenga en cuenta que esto no ocurre con el kit Allprep DNA/RNA 96, ya que este producto se suministra con el tampón RLT). Esta formación de espuma se reduce sustancialmente añadiendo el reactivo DX (suministrado por separado) al tampón RLT Plus a una concentración final del 0,5 % (v/v) antes de iniciar la ruptura y homogeneización. El reactivo DX se ha probado cuidadosamente con los kits y no afecta la pureza del ARN ni a aplicaciones posteriores, como la RT-PCR en tiempo real. El tampón RLT Plus con el reactivo DX puede conservarse a temperatura ambiente (15-25 °C) durante al menos 9 meses.

Un protocolo complementario permite la purificación opcional de proteínas. Para experimentos en los que se preparan regularmente ADN, ARN y proteínas de cada muestra, se puede utilizar el minikit AllPrep ADN/ARN/Proteína.

Para un procesamiento de alto rendimiento, las placas de purificación de 96 pocillos del kit AllPrep DNA/RNA 96 son aptas tanto para ADN como para ARN. Las placas se procesan de forma rápida y sencilla mediante una centrífuga (Centrífuga 4-16 y Rotor de placas 2 x 96) o una combinación de vacío (QIAvac 96) y centrífuga. Se pueden procesar tanto células cultivadas como tejidos fáciles de lisar.

Los kits AllPrep de ADN/ARN forman parte de la solución de QIAGEN para preparar múltiples analitos a partir de la misma muestra. Estos incluyen el reactivo tisular Allprotect, que estabiliza el ADN, el ARN y las proteínas en los tejidos, y el reactivo celular RNAprotect, que estabiliza el ADN y el ARN en las células. Ambos reactivos proporcionan una estabilización inmediata a temperatura ambiente. Para los tejidos, los sistemas TissueRuptor y TissueLyser proporcionan una disrupción rápida con rendimientos bajos y altos.

Aplicaciones

El ADN genómico purificado tiene una longitud promedio de 15 a 30 kb, dependiendo de las condiciones de homogeneización, y es adecuado para cualquier aplicación, incluida la secuenciación de próxima generación, los análisis Southern, dot y slot blot, y la PCR y PCR multiplex.

El ARN total purificado se puede utilizar en cualquier aplicación, como RT-PCR de secuenciación de ARN y RT-PCR en tiempo real, visualización diferencial, síntesis de ADNc, análisis Northern, dot-blot y slot-blot, y microarrays.

Un protocolo complementario permite la purificación opcional de la proteína. La proteína purificada se desnaturaliza y puede utilizarse en aplicaciones como SDS-PAGE, Western blot y electroforesis en gel 2D.