Qiagen, 873121, kit de PCR therascreen PIK3CA RGQ (24)

Para 24 reacciones: 6 mezclas de reacción, control positivo, ADN polimerasa Taq, agua para NTC y agua para dilución de la muestra

Características

- Detección fiable de mutaciones clínicamente relevantes en el gen PIK3CA
- Alta sensibilidad y especificidad
- Resultados en menos de dos días laborables
- Reactivos y mezclas de reacción listos para usar
- Análisis de datos automatizado mediante el software Rotor-Gene AssayManager v2.1

Detalles del producto

El kit therascreen PIK3CA RGQ PCR es una prueba de PCR diagnóstica in vitro cualitativa en tiempo real para la detección de 11 mutaciones en el gen de la subunidad catalítica alfa de la fosfatidilinositol 3-quinasa (PIK3CA) utilizando una muestra de ADN extraída de tejido tumoral mamario fijado con formalina e incluido en parafina (FFPE) o plasma sanguíneo anticoagulado con K2EDTA, tomado de una paciente con cáncer de mama.

El kit therascreen PIK3CA RGQ PCR es la primera prueba de diagnóstico complementario (CDx) aprobada por la FDA para ayudar en la selección de pacientes con cáncer de mama que pueden ser elegibles para el tratamiento con el inhibidor alfa-selectivo de PI3K, PIQRAY (alpelisib), en combinación con el antagonista del receptor de estrógeno, fulvestrant.

Actuación

Kit de PCR therascreen PIK3CA RGQ - tejido
Positivo: Negativo
Kit PCR therascreen PIK3CA RGQ - plasma: Positivo
Negativo: 149
Inválido: 0
Total: 328

Medida de acuerdo: Porcentaje de acuerdo % (N)
Porcentaje de acuerdo positivo (PPA): 55% (179/328)
Porcentaje de acuerdo negativo (NPA)*: 97% (209/215)
Porcentaje general de acuerdo (OPA): 72% (388/543)

El estudio SOLAR-1 (CBYL719C2301) fue un ensayo clínico internacional multicéntrico, aleatorizado, doble ciego y controlado con placebo de fase III que comparó el tratamiento con PIQRAY más fulvestrant con placebo más fulvestrant en hombres y mujeres posmenopáusicas con cáncer de mama avanzado con receptores hormonales positivos y HER2 negativo que había progresado durante o después del tratamiento con inhibidores de la aromatasa. Se incluyó a un total de 572 pacientes con cáncer de mama en dos cohortes, con o sin mutación en PIK3CA. Las pacientes fueron aleatorizadas para recibir PIQRAY 300 mg más fulvestrant o placebo más fulvestrant en una proporción 1:1. El criterio de valoración principal fue la supervivencia libre de progresión (SLP), determinada mediante los criterios RECIST v1.1, según la evaluación del investigador.

Resultados utilizando muestras de tejido FFPE

El estudio SOLAR-1 demostró que, en pacientes cuyos tumores presentaban mutaciones específicas de PIK3CA, el tratamiento con PIQRAY más fulvestrant prolongó la mediana de SSP en 5,3 meses (11 meses en total), una cifra clínicamente significativa, en comparación con el tratamiento con placebo más fulvestrant, y confirió una reducción estimada del 35 % del riesgo de progresión de la enfermedad o muerte. El análisis del subgrupo de pacientes CDx con mutación de PIK3CA positiva (347 pacientes) demostró que quienes recibieron PIQRAY más fulvestrant presentaron un riesgo estimado del 36 % menor de progresión de la enfermedad o muerte (HR = 0,64; IC del 95 %: 0,48, 0,85) que los pacientes que recibieron placebo más fulvestrant.

Por el contrario, la SSP también se estimó en la población negativa al kit therascreen PIK3CA RGQ PCR y no se observó ningún beneficio en la SSP en esos pacientes (HR = 0,85; IC del 95 %: 0,58, 1,25).

Por lo tanto, la importancia de establecer el estado de mutación de PIK3CA al identificar pacientes para el tratamiento con PIQRAY más fulvestrant es clara; solo los pacientes cuyos tumores albergan mutaciones de PIK3CA procesables probablemente experimenten un aumento clínicamente significativo en la SSP.

Resultados utilizando muestras de plasma

Las muestras clínicas de plasma de sangre venosa periférica completa anticoagulada con K2EDTA recolectadas de pacientes con cáncer de mama aleatorizados en SOLAR-1 antes del inicio del tratamiento del estudio (línea de base) se analizaron retrospectivamente con el kit de PCR therascreen PIK3CA RGQ para evaluar la concordancia entre los resultados del tejido y del plasma.

De los 328 pacientes con resultado positivo en tejido con el kit therascreen PIK3CA RGQ PCR, 179 dieron resultado positivo en plasma con el kit therascreen PIK3CA RGQ PCR. De los 215 pacientes con resultado negativo en tejido con el kit therascreen PIK3CA RGQ PCR, 209 dieron resultado negativo en plasma con el kit therascreen PIK3CA RGQ PCR. No se observaron resultados inválidos en plasma (Tabla 1).

La concordancia (PPA, NPA y OPA) entre los resultados del plasma y el tejido del kit therascreen PIK3CA RGQ PCR se calculó utilizando los resultados del tejido del kit therascreen PIK3CA RGQ PCR como referencia (Tabla 2). Las estimaciones puntuales de PPA, NPA y OPA fueron del 55 %, 97 % y 72 %, respectivamente.

Por lo tanto, el kit therascreen PIK3CA RGQ PCR permite una selección confiable de pacientes con cáncer de mama con alteraciones de PIK3CA que pueden ser elegibles para el tratamiento con PIQRAY.

Principio

El kit therascreen PIK3CA RGQ PCR consta de seis mezclas de reacción: una reacción de control dirigida al exón 15 y cinco reacciones específicas para cada mutación, utilizadas para detectar 11 mutaciones en los exones 7, 9 y 20 del gen PIK3CA (exón 7: C420R; exón 9: E542K; E545A, E545D [solo 1635G>T], E545G, E545K, Q546E, Q546R; y exón 20: H1047L, H1047R, H1047Y). La tecnología específica de alelos permite una detección precisa y altamente reproducible de mutaciones; el ADN se amplifica selectivamente mediante cebadores ARMS, sondas y pinzas de PCR, con detección de señal sensible mediante el instrumento Rotor-Gene Q MDx (US). El informe de resultados está totalmente automatizado. Si tanto los controles de ejecución como los resultados de la muestra son válidos, el kit therascreen PIK3CA RGQ PCR determina cualitativamente el estado de mutación de las muestras de ADN e informa si la muestra contiene una o más mutaciones.

Procedimiento

El proceso de análisis, sencillo y directo, comienza con la extracción manual de ADN de tejido tumoral mamario FFPE (con el kit QIAamp DSP DNA FFPE Tissue) o de plasma anticoagulado con K₂EDTA (con el kit QIAamp DSP Circulating Nucleic Acid), seguida de una PCR en tiempo real de alta sensibilidad en el instrumento Rotor-Gene Q MDx (US). El software Rotor-Gene AssayManager determina las mutaciones con rapidez y precisión e informa de los resultados, informando al operador del sistema si una o más de las 11 mutaciones detectadas por el kit están presentes. El kit es un ensayo cualitativo que puede obtener resultados en menos de dos días laborables.

Aplicaciones

El kit therascreen PIK3CA RGQ PCR permite la detección cualitativa de 11 mutaciones en el gen PIK3CA para uso diagnóstico in vitro. Es un ensayo CDx aprobado por la FDA para identificar pacientes con cáncer de mama con alteraciones susceptibles de tratamiento, para quienes el tratamiento con PIQRAY (alpelisib) podría ser adecuado.