Qiagen, 954634, Kit de ADN/ARN EZ2 PowerFecal Pro (48)

Para el aislamiento automatizado de ADN microbiano, ARN o ácidos nucleicos totales de muestras de heces utilizando EZ2 Connect

Características

- Aislamiento automatizado de ácidos nucleicos microbianos de alta calidad en EZ2 Connect
- Cartuchos precargados para minimizar los errores humanos
- Ácidos nucleicos de alta pureza gracias a la tecnología de eliminación de inhibidores pendiente de patente
- Tres protocolos para aislar sólo ADN, sólo ARN o ácidos nucleicos totales

Detalles del producto

Con el kit de ADN/ARN EZ2 PowerFecal Pro, puede automatizar el aislamiento de ácidos nucleicos de heces en el EZ2 Connect. El kit utiliza la Tecnología de Eliminación de Inhibidores® (IRT) de segunda generación, lo que resulta en altos rendimientos de ADN, ARN o ácidos nucleicos totales de alta pureza, que pueden usarse inmediatamente en aplicaciones posteriores, como RT-PCR, qPCR, dPCR y secuenciación de nueva generación. La tecnología probada de microesferas y la química de lisis completan este protocolo patentado, fácil de usar.

Actuación

El kit de ADN/ARN EZ2 PowerFecal Pro permite la extracción automatizada de ADN, ARN o ácidos nucleicos totales de alto rendimiento (Figuras 1 y 2) y alta pureza (Figura 3) a partir de muestras de heces. El kit elimina eficazmente los inhibidores de PCR para ácidos nucleicos de alta pureza, con un rendimiento similar al de los protocolos de columna de centrifugación PowerFecal Pro (Figura 4).

Principio

El kit de ADN/ARN EZ2 PowerFecal Pro aísla eficazmente ADN, ARN o ácidos nucleicos totales de muestras de heces, según el protocolo de aislamiento utilizado. Tras el paso combinado de lisis y eliminación de inhibidores, se transfiere el eluido al EZ2 Connect y se puede elegir uno de los tres protocolos de extracción: solo ADN, solo ARN o ácidos nucleicos totales. Los pasos adicionales de digestión enzimática para extracciones solo de ADN y solo ARN se realizan en el instrumento. Las enzimas correspondientes, ARNasa A (17.500 U) (n.º de cat. 19101) y el kit de ADNasa sin ARNasa (50 U) (n.º de cat. 79254), deben adquirirse por separado.

Procedimiento

La cantidad recomendada de material de partida es de 50 mg de heces, con un máximo de 100 mg. Tenga en cuenta que el uso de fenol cloroformo alcohol isoamílico es crucial para la eliminación de los inhibidores secundarios y la obtención de altos rendimientos de ácidos nucleicos. Al mismo tiempo, también desactiva la ARNasa, lo que permite la extracción de ARN de alta calidad.

Almacenamiento y conservación de muestras

El rendimiento y la integridad de los ácidos nucleicos aislados de microbios en heces dependen en gran medida del estado del sistema digestivo, la dieta del individuo y el tiempo transcurrido entre la recolección de la muestra y su conservación. Para optimizar la calidad de los ácidos nucleicos de las heces, procese la muestra lo antes posible después de la recolección. Para estabilizar las muestras de heces a temperatura ambiente, utilice el reactivo PowerProtect ADN/ARN (más información). Procesamiento automatizado en el EZ2 Connect.

Los instrumentos EZ2 Connect pueden realizar todos los pasos posteriores a la lisis y la disrupción de la muestra. Esta automatización se basa en tecnología de partículas magnéticas e incluye la unión de ácidos nucleicos, la digestión enzimática opcional (cuando solo se aísla ADN o ARN), el lavado y la elución. Se pueden procesar hasta 24 muestras en una sola ejecución.

La tecnología de partículas magnéticas combina la velocidad y eficiencia de la purificación de ácidos nucleicos con sílice y la facilidad de manejo de las partículas magnéticas. Los ácidos nucleicos se aíslan de los lisados ​​mediante su unión a la superficie de sílice de las partículas en presencia de una sal caotrópica. Posteriormente, las partículas se separan de los lisados ​​mediante un imán. Los lavados adicionales eliminan cualquier contaminante residual. Finalmente, los ácidos nucleicos se eluyen eficientemente. Todas las digestiones enzimáticas, si solo se aísla ADN o ARN, se realizan automáticamente durante los procedimientos de extracción.

Aplicaciones

El kit de ADN/ARN EZ2 PowerFecal Pro permite el aislamiento de ADN, ARN o ácidos nucleicos totales de alta calidad, que pueden utilizarse inmediatamente en aplicaciones posteriores, como RT-PCR, qPCR, PCR digital y secuenciación de última generación (p. ej., RNA-seq o metatranscriptoma). Consiga un nuevo nivel de flexibilidad, comodidad, velocidad y reproducibilidad automatizando completamente la extracción de ácidos nucleicos de heces y una amplia variedad de tipos de muestras con el EZ2 Connect (n.° de cat. 9003210). Descomponga y homogeneice los tipos de muestra más complejos con el Tissuelyser III (n.° de cat. 9003240) y los adaptadores (n.° de cat. 69982 o 11993 y 11990), disponibles en múltiples tamaños de muestra.