Product Description
Para 48 preparaciones: cartucho EZ2 AllPrep DNA/RNA FFPE, puntas de filtro y portapuntas desechables, tubos, solución de eliminación de parafina, proteinasa K, ADNasa, agua sin ARNasa y tampones.
Características
- Tecnología patentada para extraer ADN y ARN de la misma muestra, sin necesidad de dividir la muestra
- La elución de ADN y ARN en fracciones separadas ofrece un análisis posterior conveniente.
- Reduce el consumo de muestra
- Optimiza la eliminación de enlaces cruzados tanto para ADN como para ARN.
- Sin incubación durante la noche con proteinasa K
Detalles del producto
El kit EZ2 AllPrep ADN/ARN FFPE se utiliza con el instrumento EZ2 Connect. Automatiza la extracción de ADN y ARN de la misma muestra en dos fracciones de elución distintas.
La tecnología del kit permite revertir la reticulación causada por la exposición de la muestra a la formalina sin necesidad de incubación con proteinasa K durante la noche.
Actuación
El kit EZ2 AllPrep DNA/RNA FFPE está diseñado para la purificación automatizada de ADN y ARN a partir de muestras FFPE, utilizando tecnología de perlas magnéticas y cartuchos precargados.
El flujo de trabajo automatizado se presenta en la figura "Purificación automatizada y simultánea de ADN y ARN a partir de muestras FFPE". Este flujo de trabajo proporciona un mayor grado de automatización (figura "Grado de automatización") y proporciona rendimientos de ácidos nucleicos superiores a partir de muestras FFPE en comparación con los flujos de trabajo manuales y de otros proveedores (figura "Rendimiento de ADN y ARN a partir de muestras FFPE de bazo", figura "Rendimiento de ADN y ARN a partir de bazo humano", figura "Rendimiento de ARN y ADN a partir de riñón y corazón de rata" y figura "Comparación de la extracción manual y automatizada"). El paso de desentrecruzamiento mejora la eficiencia y la complejidad de la biblioteca (figura "Eficiencia de desentrecruzamiento" y figura "Complejidad de la biblioteca").
Principio
La extracción de ADN y ARN de la misma muestra es necesaria para comparar datos genómicos y transcriptómicos de forma fiable. Normalmente, esto se realiza dividiendo la muestra en dos reacciones/tubos/recipientes separados. Las extracciones se procesan por separado. Así, se extrae el ADN de una parte de la muestra y el ARN de la otra.
Los métodos convencionales presentan dos desventajas principales: en primer lugar, la cantidad de ácidos nucleicos que se pueden extraer de la muestra se reduce a la mitad. En segundo lugar, dado que el ADN se extrae de un grupo de células y el ARN de otro, pueden existir diferencias en las propiedades de las células de origen.
El procedimiento patentado AllPrep ADN/ARN FFPE incuba muestras de tejido FFPE en un tampón de lisis que libera el ARN en el sobrenadante y deja el ADN en el sedimento. El ARN y el ADN se purifican en tubos separados, pero dentro del mismo proceso automatizado, utilizando un solo cartucho en el instrumento EZ2 Connect. De esta forma, se puede aislar ADN y ARN de hasta 24 muestras simultáneamente.
Eliminación de enlaces cruzados
La eliminación prolongada de enlaces cruzados a alta temperatura revierte más enlaces cruzados, pero también aumenta la fragmentación de los ácidos nucleicos. El ARN es más susceptible a la fragmentación inducida por calor que el ADN, pero también se ve menos afectado por los enlaces cruzados.
Por lo tanto, las condiciones óptimas para la desreticulación del ADN y el ARN son diferentes.
Al generar lisados separados para ARN y ADN, el flujo de trabajo EZ2 AllPrep DNA/RNA FFPE permite condiciones óptimas de eliminación de enlaces cruzados para cada tipo de ácido nucleico.
Procedimiento
La tecnología EZ2 AllPrep ADN/ARN FFPE solubiliza e incuba una sola muestra FFPE para liberar el ARN en el sobrenadante, mientras que el ADN permanece en el pellet. El sobrenadante se incuba para eliminar la reticulación del ARN. Finalmente, los tubos que contienen por separado el sobrenadante y el/los pellet(s) se transfieren a EZ2 Connect.
El EZ2 Connect automatiza todos los pasos restantes del flujo de trabajo. Estos incluyen un paso adicional de lisis y eliminación de enlaces cruzados para el ADN, la unión de ácidos nucleicos a partículas magnéticas, la eliminación de contaminantes con múltiples pasos de lavado y la elución del ADN y el ARN en diferentes tubos (consulte el flujo de trabajo EZ2 AllPrep DNA/RNA FFPE).
Aplicaciones
El ADN y el ARN purificados con el kit EZ2 AllPrep DNA/RNA FFPE se pueden utilizar para PCR en tiempo real, pirosecuenciación y otras aplicaciones posteriores.
Order Guidelines
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3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
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