Qiagen, 960241, Kit QIAGEN Plasmid Plus 96 BioRobot (4)

Para minipreparaciones de 4 x 96 plásmidos: placas TurboFilter 96 y placas Plasmid Plus 96, tampones, reactivos, bloques S y microtubos de elución; para usar con el sistema universal BioRobot

Características

- ADN plasmídico de grado de transfección con niveles de endotoxina <1 EU/µg ADN
- Pureza del ADN comparable a la tecnología de intercambio de aniones
- Altos rendimientos (hasta 50 µg)
- Manejo cómodo y procedimiento sencillo.
- Opciones de procesamiento al vacío, centrifugación y automatizado.

Detalles del producto

Los kits QIAGEN Plasmid Plus 96 ofrecen un método único para la preparación de plásmidos en formato de 96 pocillos. Las muestras pueden procesarse cómodamente con el QIAvac 96 y/o una centrífuga, o automatizarse en el Sistema Universal BioRobot. Su química de unión patentada permite obtener hasta 50 µg de ADN plasmídico apto para transfección por pocillo a partir de hasta 5 ml de un cultivo de E. coli. Los niveles de endotoxinas se reducen a niveles inferiores a 1 UE/µg de ADN gracias a un tampón de reducción de endotoxinas específico. Para obtener resultados óptimos, se recomienda utilizar este producto junto con QIAvac 96.

Actuación

Rendimientos constantemente altos de ADN plasmídico listo para usar

La tecnología QIAGEN Plasmid Plus ofrece el mismo rendimiento y calidad que la tecnología de intercambio aniónico. Se pueden obtener altos rendimientos de hasta 50 µg de ADN plasmídico apto para transfección (véase la figura "Altos rendimientos de ADN plasmídico").

Niveles muy bajos de endotoxinas

Los kits incluyen un tampón de reducción de endotoxinas que reduce eficazmente las endotoxinas bacterianas a niveles típicamente inferiores a 1 EU/µg de ADN, lo que proporciona una calidad de ADN plasmídico adecuada para la transfección en líneas celulares sensibles (consulte las figuras "Niveles muy bajos de endotoxinas" y "Transfección altamente eficiente en una línea celular sensible").

Principio

Los kits QIAGEN Plasmid Plus 96 se basan en la tecnología QIAGEN Plasmid Plus, un método único para la preparación de plásmidos. El procedimiento se basa en una química de unión no caotrópica que garantiza una selectividad y una calidad del ADN comparables a las de las preparaciones de intercambio aniónico. Tras la clarificación del lisado, un sencillo procedimiento de unión, lavado y elución produce ADN plasmídico altamente concentrado, listo para su uso directo en aplicaciones posteriores. La química y el diseño únicos de las placas Plasmid Plus 96 permiten una alta capacidad de unión.

Procedimiento

Este método único para la preparación de plásmidos en formato de 96 pocillos proporciona ADN plasmídico altamente puro y de grado de transfección mediante un procedimiento simple de unión-lavado-elución (consulte el diagrama de flujo "Procedimiento QIAGEN Plasmid Plus 96").

El protocolo QIAGEN Plasmid Plus 96 Miniprep comienza con un procedimiento de lisis alcalina modificado. Tras la neutralización, los lisados ​​se clarifican utilizando una placa TurboFilter 96. Se añade un tampón de unión no caotrópico al lisado clarificado para optimizar la unión del ADN plasmídico a la membrana de la placa Plasmid Plus 96. Este exclusivo tampón de unión proporciona condiciones de unión muy específicas, lo que resulta en una calidad de ADN comparable a la de las preparaciones de intercambio aniónico. Un paso de lavado con un tampón de reducción de endotoxinas produce ADN plasmídico apto para la transfección en la mayoría de las líneas celulares (véase la figura "Transfección de alta eficiencia en líneas celulares sensibles"). La química de unión patentada permite la purificación de hasta 50 µg de ADN plasmídico por pocillo a partir de un cultivo de E. coli de 5 ml (véase la figura "Altos rendimientos de ADN plasmídico").

Opciones de procesamiento convenientes y flexibles

El procedimiento puede automatizarse completamente con el kit QIAGEN Plasmid Plus 96 BioRobot en el sistema BioRobot Universal. Como alternativa, se puede utilizar el QIAvac 96 para la purificación del lisado con la placa TurboFilter 96, y la unión del ADN y el lavado se realizan con la placa Plasmid Plus 96. El secado y la elución pueden realizarse con el QIAvac 96 o con una centrífuga compatible. Además, el procedimiento completo puede realizarse con una centrífuga compatible.

Aplicaciones

- Transfección, incluso en líneas celulares sensibles
- Preparación de vectores de horquilla corta (sh-vectores)
- Modificaciones enzimáticas
- Clonación
- Digestión con restricción

El ADN plasmídico purificado mediante los kits QIAGEN Plasmid Plus 96 es muy adecuado para una amplia variedad de aplicaciones, entre las que se incluyen: