Qiagen, 970530, Kit de pirometría NRAS (24)

Para 24 reacciones: cebadores de secuenciación, cebadores de PCR, ADN de control no metilado, mezcla maestra de PCR PyroMark, concentrado CoralLoad, tampones y reactivos

Características

- Resultados completos en tiempo real
- Cuantificación precisa de mutaciones en el gen NRAS
- Fácil detección de mutaciones complejas
- El contexto de secuencia proporciona un control integrado del ensayo.
- Análisis flexible posterior a la ejecución

Detalles del producto

El kit NRAS Pyro es un kit de detección molecular para la identificación de mutaciones en el gen NRAS. El kit proporciona cebadores y reactivos para la amplificación del gen NRAS, además de tampones, cebadores y reactivos para la detección y cuantificación de mutaciones en tiempo real mediante la tecnología de pirosecuenciación en el sistema PyroMark Q24.

Principio

- Codón 12/13: G12A, G12C, G12D, G12R, G12S, G12V, G13A, G13C, G13D, G13R, G13S, G13V
- Codón 61: Q61E, Q61H, Q61K, Q61L, Q61P, Q61R

El kit NRAS Pyro se utiliza para la medición cuantitativa de mutaciones en los codones 12, 13 y 61 del gen humano NRAS en tiempo real mediante la tecnología de pirosecuenciación del sistema PyroMark Q24. El gen NRAS codifica un homólogo del oncogén viral RAS (v-ras) del neuroblastoma GTPasa. Las mutaciones en NRAS se encuentran en aproximadamente el 13-25 % de todos los melanomas malignos, y se presentan con frecuencia en los codones 12, 13 y 61. Estas mutaciones provocan la activación constitutiva de las vías de señalización de NRAS.

Se detectan las siguientes mutaciones:

Procedimiento

Tras la PCR con cebadores dirigidos a los codones 12/13 y 61, los amplicones se inmovilizan en microesferas de estreptavidina-sefarosa de alto rendimiento. Se prepara ADN monocatenario y los cebadores de secuenciación correspondientes se annealizan con él. Las muestras se analizan en el sistema PyroMark Q24 utilizando un archivo de configuración de ejecución y un archivo de ejecución. La "Secuencia a analizar" puede ajustarse para la detección de mutaciones raras después de la ejecución (véanse las figuras "Rastro del pirograma de una mutación de GGT a AGT en la base 1 del codón 12" y "Rastro del pirograma del reanálisis de la muestra en la figura anterior").

Aplicaciones

- Codón 12: G12A, G12C, G12D, G12R, G12S, G12V
- Codón 13: G13A, G13C, G13D, G13R, G13S, G13V
- Codón 61: Q61E, Q61H, Q61K, Q61L, Q61P, Q61R

El kit NRAS Pyro se utiliza para la detección de mutaciones en los codones 12, 13 y 61 del gen NRAS humano. El kit permite un análisis cuantitativo y preciso de mutaciones, aplicable a diversos campos de investigación, como la investigación oncológica y la epigenética.

Se detectan las siguientes mutaciones: