Product Description
Descripción general
La estreptavidina se ha marcado con criptato de Eu. La biotina se une a la estreptavidina con alta afinidad (Ka = 10¹5 M⁻¹). La unión es rápida y estable, lo que la convierte en una opción ideal para diversos ensayos, como ensayos enzimáticos, ensayos de unión proteína-proteína y ensayos de biología molecular.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:
Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo
En un ensayo de interacción HTRF, un componente se marca (directa o indirectamente) con el donante y el otro con el aceptor (de nuevo, directa o indirectamente). La intensidad de la señal es proporcional a la unión de ambos componentes. En el ejemplo mostrado: el criptato de estreptavidina-Eu se une al componente A marcado biotinilado, mientras que el componente B* se une a un anticuerpo específico marcado con un aceptor HTRF. El componente B también puede estar marcado, fusionado a Fc. En estos casos, utilice para la detección el reactivo HTRF correspondiente (anti-Tag, anti-especie, protA, estreptavidina), marcado con el aceptor.
Protocolo de ensayo
El ejemplo de la derecha describe el protocolo con un volumen final de ensayo de 20 µL para detectar la interacción entre un compañero A marcado con biotina y un compañero B* sin marcar. Dispensar los dos compañeros (10 µL), incubar, añadir criptato de estreptavidina-Eu (5 µL) y anti-compañero B marcado con aceptor (5 µL), incubar y leer. *El compañero B también puede estar marcado, fusionado con Fc o marcado directamente. En estos casos, utilizar para la detección el reactivo HTRF correspondiente (anti-Tag, antiespecie, protA, estreptavidina), marcado con donador. Aplicación: Interacción proteína-proteína.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Grupo de productos: reactivo fluorescente
Condiciones de envío - Envío a temperatura ambiente
Ensayo de unión de clase objetivo
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Enfermedades infecciosas cardiovasculares Inflamación Metabolismo/Diabetes EHNA/Fibrosis Neurociencia Oncología e inflamación Enfermedades raras
Tamaño de la unidad: 20.000 puntos de ensayo
Order Guidelines
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Collaboration
Tony Tang
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