Product Description
Descripción general
El anticuerpo monoclonal anti-FLAG-Eu criptato es un anticuerpo generado contra las proteínas de fusión FLAG® marcadas con criptato de Eu. El anticuerpo anti-FLAG reconoce la secuencia FLAG® en el extremo N-terminal, intraterminal o C-terminal de las proteínas de fusión FLAG®.
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Este reactivo se puede utilizar tanto en formato bioquímico como celular para estudiar una amplia variedad de interacciones: proteína/proteína, proteína/péptido, proteína/ADN, proteína/ARN, proteína/carbohidrato, proteína/molécula pequeña o receptor/ligando.
HTRF puede detectar una amplia gama de constantes de afinidad que van desde picomolar hasta milimolar bajo.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:
Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo
En un ensayo de interacción HTRF, un componente se marca (directa o indirectamente) con el donante y el otro con el aceptor (de nuevo, directa o indirectamente). La intensidad de la señal resultante es proporcional a la unión de ambos componentes. En el ejemplo mostrado, el criptato del AcM anti-FLAG-Eu se une al componente A marcado con FLAG, mientras que el componente B* se une a un Ac específico marcado con un aceptor HTRF. El componente B* también puede estar biotinilado, marcado o fusionado a Fc. En estos casos, utilice el reactivo HTRF correspondiente (anti-Tag, anti-especie, protA, estreptavidina) marcado con un aceptor para la detección.
Protocolo de ensayo
El ejemplo de la derecha describe el protocolo con un volumen final de ensayo de 20 µL para la detección de una interacción entre un compañero A marcado con FLAG y un compañero B* sin marcar. Dispensar los dos compañeros (10 µL), incubar, añadir MAb anti-FLAG-Eu criptato (5 µL) y anti-compañero B marcado con aceptor (5 µL), incubar y leer. El compañero B* también puede estar biotinilado, marcado, fusionado a Fc o marcado directamente. En estos casos, utilizar el reactivo HTRF correspondiente (anti-Tag, anti-especie, protA, estreptavidina) marcado con un aceptor para la detección. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Grupo de productos: reactivo fluorescente
Condiciones de envío - Envío a temperatura ambiente
Clase objetivo: fosfoproteínas
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 20.000 puntos de ensayo
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Collaboration
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