Revvity, 61P02KAZ, conjugado Eu de pAb antifosfo-AKT (Ser/Thr) HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
El sustrato anti-fosforilación de AKT-Cripto Eu es un anticuerpo policlonal marcado que permite la detección de Akt cuando se fosforila en Ser o Thr, precedido por arginina o lisina en las posiciones -5 y -3. No presenta reacción cruzada con Ser o Thr fosforiladas en diferentes configuraciones (ligeras reacciones cruzadas en las posiciones -2 y +2). No detecta la Akt no fosforilada. Esto permite la construcción de un ensayo bioquímico específico para quinasas. Se puede utilizar cualquier tipo de sustrato, desde pequeños péptidos sintéticos hasta sustratos naturales, lo que se traduce en una gran versatilidad de detección. La HTRF permite realizar ensayos a concentraciones fisiológicas de ATP.
Cómo funciona
Principio del ensayo
Los ensayos de quinasa HTRF suelen utilizar una combinación de un anticuerpo anti-residuo de fósforo marcado con criptato de europio, SA-XL665, y un sustrato biotinilado*. La señal es proporcional a la concentración de residuos de fósforo. *Alternativamente, se pueden utilizar otras etiquetas como 6HIS, GST, c-myc, DNP o FLAG para marcar el sustrato de la quinasa.

Protocolo de ensayo
Los ensayos de quinasas HTRF constan de dos fases básicas: 1. Etapa enzimática: El sustrato biotinilado se incuba con la quinasa de interés y con los compuestos en presencia de cofactores. La reacción comienza con la adición de ATP. 2. Etapa de detección: El sustrato biotinilado fosforilado se detecta mediante la adición de estreptavidina-XL665 y PAb anti-fosfo sustrato AKT-criptato de Eu, preparado en un tampón con EDTA para detener la reacción enzimática. Aplicación: Ensayo enzimático bioquímico.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Modificación molecular-fosforilación
Grupo de productos: reactivo fluorescente
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: quinasa
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Enfermedades infecciosas cardiovasculares Inflamación Metabolismo/Diabetes EHNA/Fibrosis Neurociencia Oncología e inflamación Enfermedades raras
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo