Revvity, 61P06KAE, mAb anti-fosfo-IκBα HTRF conjugado con Eu, 500 puntos de ensayo

Descripción general
El criptato anti-fosfo de I kappa B alfa-Eu es un anticuerpo monoclonal marcado que permite la detección rápida de I kappa B alfa solo cuando está fosforilado en Ser32/36; no presenta reacción cruzada con la secuencia no fosforilada correspondiente. Esto permite la construcción de un ensayo bioquímico de quinasas altamente específico. Se puede utilizar cualquier tipo de sustrato, desde pequeños péptidos sintéticos hasta sustratos naturales, lo que se traduce en una gran versatilidad de detección. Dado que el HTRF tolera concentraciones extremadamente altas de ATP, se puede realizar un ensayo a concentraciones fisiológicas de ATP.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo
Los ensayos de quinasa HTRF suelen utilizar una combinación de un anticuerpo anti-residuo de fósforo marcado con criptato de europio, SA-XL665, y un sustrato biotinilado*. La señal es proporcional a la concentración de residuos de fósforo. *Alternativamente, se pueden utilizar otras etiquetas como 6HIS, GST, c-myc, DNP o FLAG para marcar el sustrato de la quinasa.

Protocolo de ensayo
Los ensayos de quinasas HTRF constan de dos fases básicas: 1. Etapa enzimática: El sustrato biotinilado se incuba con la quinasa de interés y con los compuestos en presencia de cofactores. La reacción comienza con la adición de ATP. 2. Etapa de detección: El sustrato biotinilado fosforilado se detecta mediante la adición de estreptavidina-XL665 y el anticuerpo monoclonal anti-fosfo I kappa B alfa-Eu criptato, preparado en un tampón con EDTA para detener la reacción enzimática. Aplicación: Ensayo enzimático bioquímico.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Modificación molecular-fosforilación
Grupo de productos: reactivo fluorescente
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: quinasa
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Enfermedades infecciosas cardiovasculares Inflamación Metabolismo/Diabetes EHNA/Fibrosis Neurociencia Oncología e inflamación Enfermedades raras
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo