Revvity, 61PAMDAB, conjugado pAb d2 de IgG antirratón HTRF, 20 000 puntos de ensayo

Descripción general
Las IgG de inmunosuero de conejo antirratón se inmunopurificaron y se marcaron con d2. El PAb anti-IgG humana-XL665 puede utilizarse para detectar la unión de anticuerpos específicos de ratón no marcados a una molécula diana o a proteínas de fusión de Ig.
HTRF se puede utilizar tanto en formatos bioquímicos como celulares para estudiar una amplia variedad de interacciones: proteína/proteína, proteína/péptido, proteína/ADN, proteína/ARN, proteína/carbohidrato, proteína/molécula pequeña, receptor/ligando.
HTRF puede detectar una amplia gama de constantes de afinidad que van desde picomolar hasta milimolar bajo.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo
En un ensayo de interacción HTRF, un componente se marca (directa o indirectamente) con el donante y el otro con el aceptor (de nuevo, directa o indirectamente). La intensidad de la señal es proporcional a la unión de ambos componentes. En el ejemplo mostrado, el PAb anti-IgG-d2 de ratón se une al componente A marcado con Fc de ratón, mientras que el componente B* se une a un Ab específico marcado con un donante HTRF. *El componente B también puede estar biotinilado, marcado y fusionado con Fc. En estos casos, utilice el reactivo HTRF correspondiente (anti-Tag, anti-especie, protA, estreptavidina) marcado con el donante para la detección.

Protocolo de ensayo
El ejemplo de la derecha describe el protocolo con un volumen final de ensayo de 20 µL para detectar la interacción entre un compañero A con etiqueta Fc fusionada de ratón y un compañero B* sin etiqueta. Dispensar los dos compañeros (10 µL), incubar, añadir PAb anti-IgG-d2 de ratón (5 µL) y anti-compañero B marcado con donante (5 µL), incubar y leer. *El compañero B también puede estar biotinilado, marcado, fusionado con Fc o marcado directamente. En estos casos, utilizar el reactivo HTRF correspondiente (anti-Tag, anti-especie, protA, estreptavidina) marcado con donante para la detección. Aplicación: Interacción proteína-proteína.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Grupo de productos: reactivo fluorescente
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: productos biológicos
Especie objetivo: ratón
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Enfermedades infecciosas cardiovasculares Inflamación Metabolismo/Diabetes EHNA/Fibrosis Neurociencia Oncología e inflamación Enfermedades raras
Tamaño de la unidad: 20.000 puntos de ensayo