Revvity, 62ASMAPEH, kit de detección de α-SMA humana HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
Tras una lesión tisular, el TGF-beta liberado localmente por las células inflamatorias activa los fibroblastos residentes o las células estrelladas hepáticas (células hepáticas estelares) quiescentes. Esto conduce a su diferenciación en miofibroblastos, cuya función es migrar al tejido dañado y sintetizar componentes de la matriz extracelular (MEC) para reparar la herida. Los miofibroblastos se caracterizan por la expresión de novo de alfa-SMA, que se incorpora a las fibras de estrés de actina y confiere a las células una alta actividad contráctil. La lesión tisular crónica provoca la formación persistente de novo de miofibroblastos (alfa-SMA+), una contracción excesiva y el depósito de MEC, lo que finalmente provoca fibrosis tisular.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo
El ensayo alfa-SMA se basa en un inmunoensayo sándwich TR-FRET que comprende dos anticuerpos, uno marcado con Eu3+-Criptato (donante) y el otro con d2 (aceptor). Los anticuerpos se unen específicamente a alfa-SMA, y la proximidad del donante y el aceptor produce una señal fluorescente TR-FRET.

Protocolo de ensayo
Protocolo de ensayo de dos placas. Para mayor flexibilidad, el ensayo puede ejecutarse con un protocolo de dos placas, donde las células se siembran, se tratan y se lisan en una placa de cultivo. Para la detección, los lisados ​​se transfieren posteriormente a una microplaca de detección de bajo volumen de 96 o 384 pocillos, donde se añaden los reactivos HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células. Los reactivos de detección pueden premezclarse y añadirse en un solo paso de dispensación para la detección directa. El ensayo puede ejecutarse con lisados ​​celulares congelados o células frescas en cultivo. Aplicación: Cuantificación de Proteínas.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Esteatohepatitis no alcohólica (EHNA) cardiovascular/fibrosis
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo