Revvity, 62BDBAR2PEB, kit de reclutamiento de β-arrestina 2 HTRF, 1000 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo celular de reclutamiento de B-arr2 monitoriza el reclutamiento de beta-arrestina 2 y AP2 mediante la activación de GPCR. El kit de reclutamiento de B-arr2 se utiliza para caracterizar el efecto de compuestos en la vía de señalización de beta-arrestina, mediante el monitoreo de la interacción entre la B-arrestina 2 endógena y AP-2 como su pareja.
Se sabe por la literatura que las investigaciones farmacológicas sobre esta interacción son relevantes cuando se investiga la vía de señalización de Beta-arrestina en un contexto de GPCR.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo del kit de reclutamiento de B-arr2
El ensayo de reclutamiento de B-arr2 monitoriza el reclutamiento de B-arrestina 2 mediado por la activación de GPCR en las células. El kit de reclutamiento de B-arr2 de Revvity es altamente sensible, lo que permite la caracterización farmacológica de compuestos que involucran las proteínas endógenas B-arrestina 2 y AP2. El kit utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para la proteína B-arr2 y AP2. En presencia de interacción B-arr2/AP2 en las células, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional al número de complejos B-arrestina 2/AP2 presentes en la muestra.

Protocolo de ensayo de reclutamiento de B-arr2 (opción 1)
La detección del reclutamiento de B-arr2 con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación, estabilización y detección. Se requieren tres lavados después del paso de estabilización. Este protocolo específico permite la detección con células no lisadas y proteínas endógenas tras la incubación ON a temperatura ambiente, manteniendo al mismo tiempo una calidad HTRF robusta.

Protocolo de ensayo de reclutamiento de B-arr2 (opción 2)
La detección del reclutamiento de B-arr2 con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa que se utiliza para cultivo, estimulación, estabilización y detección. Se requieren tres lavados después del paso de estabilización. Este protocolo específico permite la detección con células no lisadas y proteínas endógenas, manteniendo al mismo tiempo una calidad HTRF robusta tras la incubación ON a temperatura ambiente.
La opción 2 del protocolo del ensayo de reclutamiento de B-arr2 permite mejorar la relación señal-ruido (S/B) mediante la eliminación de 80 µL de reactivos de detección tras la incubación ON a temperatura ambiente. Aplicación: Detección de segundos mensajeros.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 200 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo-GPCR
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Enfermedades infecciosas cardiovasculares Inflamación Metabolismo/Diabetes EHNA/Fibrosis Neurociencia Oncología e inflamación Enfermedades raras
Tamaño de la unidad: 1000 puntos de ensayo