Revvity, 62D2DPEA, kit de etiquetado HTRF d2

Descripción general
El kit de etiquetado d2 es adecuado para el etiquetado rápido y sencillo de péptidos, proteínas y oligonucleótidos con d2.
Este kit está diseñado para necesidades de etiquetado rápido de volúmenes muy pequeños, como determinar el mejor anticuerpo entre varios anticuerpos disponibles para el desarrollo del ensayo HTRF.
La d2 activada con N-hidroxisuccinimida suministrada reacciona con las aminas primarias transportadas por las biomoléculas a etiquetar, para una conjugación simplificada.
El kit incluye todos los materiales necesarios para el procedimiento de etiquetado (excepto dispositivos de diálisis y concentración).
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo
El procedimiento de marcaje se realiza en condiciones muy suaves. Como se muestra aquí, el proceso consta de una etapa de incubación con el colorante desecado, seguida de una purificación en una columna desechable. El kit incluye la columna de purificación y el tampón para purificar el conjugado, así como un calibrador para definir la dilución de trabajo ideal del material marcado en ensayos HTRF. Dependiendo del peso molecular de la molécula diana y la naturaleza del colorante, cada kit permite marcar desde 5-25 µg (proteína, peso molecular de 15 kDa) hasta 50-250 µg (anticuerpo, peso molecular de 150 kDa).

Protocolo de ensayo
El procedimiento de marcaje se describe a la derecha. Se añaden 100 µL de la molécula diana (16,67 µM) en tampón de carbonato a pH 9,0 al vial d2. Tras una incubación de 45 minutos a temperatura ambiente, la proteína marcada se eluye en una columna equilibrada. Tras desechar 700 µL de tampón de elución, la molécula marcada se recoge en una fracción de 400 µL. Aplicación: Marcaje
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Grupo de productos: reactivo fluorescente
Condiciones de envío - Envío a temperatura ambiente
Tecnología-TR-FRET
Kit de tamaño de unidad 1