Revvity, 62H4TPAE, kit de detección celular de histona H4 total humana y de ratón epigenética HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
La histona 4 es una de las proteínas histonas fundamentales que, junto con otras histonas, participa en el empaquetamiento del ADN en un estado de cromatina condensada. Su función depende de su estado de acetilación (un grupo acetilo por lisina) en varios sitios (Lys5, Lys8, Lys12 y Lys16) de la cola N-terminal. La regulación deficiente de la acetilación de las histonas está estrechamente relacionada con la iniciación y la progresión del cáncer, lo que convierte a las enzimas histona acetilasa y desacetilasa en prometedoras dianas farmacológicas.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o el tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo de histona H4 total
El ensayo de histona H4 total mide los niveles de histona H4 en las células. A diferencia del Western Blot, este ensayo se realiza completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. Utiliza dos anticuerpos: uno marcado con un fluoróforo donante y el otro con un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína.
En presencia de la histona H4, esto permite la formación de un inmunocomplejo que involucra ambos anticuerpos marcados, lo que acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de proteína total presente en la muestra.

Protocolo de ensayo de dos placas para la histona H4 total
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección de histona H4 total HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa para la histona H4 total
La detección de la histona H4 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis epigenético A
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 10 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Objetivo-Histona H4
Clase objetivo: epigenética
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área Terapéutica-Inmuno-oncología Oncología
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo