Revvity, 62HPIL1BPEH, kit de detección de pro IL-1β humana HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
La pro-IL-1β, también conocida como precursora de IL-1β, es una proteína de 31 kDa precursora de IL-1β. Se produce en respuesta a motivos moleculares transportados por patógenos, denominados «patrones moleculares asociados a patógenos» (PAMP). La inducción de la expresión de pro-IL-1β se conoce como «paso de cebado» y constituye un estímulo de secreción ineficiente. El procesamiento y la escisión de pro-IL-1β en IL-1β activa están condicionados por la etapa de activación que involucra PAMP, o DAMP (patrón molecular asociado a peligro, moléculas endógenas liberadas de células muertas).
La pro IL-1β es escindida por la proteasa proinflamatoria caspasa-1, que se activa mediante el reclutamiento a un complejo multiproteico denominado inflamasoma.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o el tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo HTRF de pro IL-1β humana
El ensayo HTRF de pro IL-1β se basa en un inmunoensayo sándwich TR-FRET que utiliza dos anticuerpos específicos, uno marcado con Eu3+-criptato (donante) y el otro con d2 (aceptor). Un anticuerpo se dirige contra la IL-1β y el segundo reconoce específicamente la pro IL-1β. Cuando ambos anticuerpos se unen a la pro IL-1β y la proximidad entre el donante y el aceptor, se genera una señal fluorescente TR-FRET. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de pro IL-1β presente en la muestra de lisado celular.

Protocolo del ensayo de pro IL-1β humana HTRF
El ensayo HTRF de pro IL-1β puede ejecutarse en una placa de detección blanca de bajo volumen de 96 o 384 pocillos (20 µL final). Como se describe aquí, las muestras (lisados ​​celulares) o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección de pro IL-1β mediante reactivos HTRF. Los anticuerpos marcados con fluoróforos HTRF pueden premezclarse y añadirse en un solo paso de dispensación. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido. Aplicación: Cuantificación de Proteínas.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Rango dinámico: 312,5 - 20 000 pg/ml
Límite de detección: 38,5 pg/mL
Límite de cuantificación: 130 pg/mL
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Objetivo-pro-IL1β
Clase objetivo: citocinas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área Terapéutica-Autoinmunidad Cardiovascular Inmuno-oncología Enfermedades Infecciosas Inflamación Neurociencia Oncología Virología
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo