Product Description
Descripción general
Este ensayo celular se ha desarrollado con reactivos y protocolos optimizados para la detección directa de niveles endógenos de H3K4Me2.
Este formato HTRF® utiliza un par de anticuerpos muy específico combinado con una extracción de núcleo altamente eficiente que permite utilizar el ensayo con una variedad de fondos celulares y para el estudio de importantes objetivos de metiltransferasas y desmetilasas, como JARID1 y MLL1.
El ensayo H3K27Me3 se puede utilizar para células adherentes o en suspensión, detección primaria o secundaria y estudios de inhibidores.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:
Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo
La dimetilación de la lisina 4 en la histona H3 se detecta mediante un ensayo sándwich con dos anticuerpos específicos: uno marcado con Eu-Criptato (donante) y el otro con d2 (aceptor). Cuando los colorantes están muy próximos, la excitación del donante con una fuente de luz desencadena una transferencia de energía por resonancia de fluorescencia (FRET), que a su vez fluoresce a una longitud de onda específica (665 nm). Un conjugado se une a la histona H3 y el otro a la marca K4Me2. La señal específica se modula positivamente en proporción a la trimetilación en la lisina 4.
Protocolo de ensayo de dos placas
Las células se siembran (estimulan) y se lisan en la misma placa de cultivo y luego se transfieren a la placa de ensayo para la detección de H3K4Me2 mediante reactivos HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia celular.
Protocolo de ensayo de una placa
La detección de H3K4Me2 con reactivos HTRF se realiza en una sola placa, utilizada para siembra, estimulación y detección. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo la calidad HTRF. Aplicación: Ensayo enzimático bioquímico.
Marca-EPIgeneous
Modalidad de detección-HTRF
Modificación molecular-metilación
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 120 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: epigenética
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica: Metabolismo/Diabetes, Neurociencia, Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo
Order Guidelines
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3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
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