Revvity, 62KD2PAD, kit de detección de histona H3 HTRF epigenética de 2-metil K36, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
Este ensayo celular se ha desarrollado con reactivos y protocolos optimizados para la detección directa de niveles endógenos de H3K36Me2. Este formato HTRF® utiliza un par de anticuerpos muy específico, combinado con una extracción de núcleo altamente eficiente, lo que permite su uso con diversos trasfondos celulares y para el estudio de importantes dianas de metiltransferasas y desmetilasas, como JMJD2A. El ensayo H3K36Me2 puede utilizarse para células adherentes o en suspensión, cribado primario o secundario y estudios de inhibidores.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo de fosfo-AKT1 (Ser473)
La dimetilación de la lisina 36 en la histona H3 se detecta mediante un ensayo sándwich con dos anticuerpos específicos: uno marcado con Eu-Criptato (donante) y el segundo con d2 (aceptor). Cuando los colorantes se encuentran muy próximos, la excitación del donante con una fuente de luz desencadena una transferencia de energía por resonancia de fluorescencia (FRET), que a su vez fluoresce a una longitud de onda específica (665 nm). Un conjugado se une a la histona H3 y el otro a la marca K36Me2. La señal específica se modula positivamente en proporción a la trimetilación en la lisina 36.

Protocolo de ensayo de dos placas
Las células se siembran (estimulan) y se lisan en la misma placa de cultivo y luego se transfieren a la placa de ensayo para la detección de H3K36Me2 mediante reactivos HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia celular.

Protocolo de ensayo de una placa
La detección de H3K36Me2 con reactivos HTRF se realiza en una sola placa, utilizada para siembra, estimulación y detección. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo la calidad HTRF. Aplicación: Ensayo enzimático bioquímico.
Marca-EPIgeneous
Modalidad de detección-HTRF
Modificación molecular-metilación
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 120 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: epigenética
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica: Metabolismo/Diabetes, Neurociencia, Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo