Revvity, 62MM2PEG, kit de detección de MMP2 humana HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo HTRF Human MMP2 está diseñado para medir las concentraciones de MMP2 (formas pro y activa) en sobrenadantes de cultivos celulares de origen humano. La metaloproteinasa de matriz (MMP) 2, también conocida como gelatinasa A, es una endopeptidasa dependiente de zinc secretada como una proenzima inactiva que luego se activa por escisión proteolítica. MMP2 desempeña un papel significativo en la reparación y remodelación tisular al degradar componentes estructurales de la matriz extracelular (ECM), como colágenos, gelatina y fibronectina. Esta endopeptidasa también desempeña un papel importante en el crecimiento celular, la migración, la inflamación y la angiogénesis, al procesar una variedad de sustratos no ECM como citocinas y quimiocinas (p. ej., pro-TGF-β, pro-IL-1β, pro-TNF-α, CXCL12, CCL7, CX3CL1). Su actividad enzimática está regulada por la interacción con sus inhibidores fisiológicos, los inhibidores tisulares de las metaloproteinasas TIMP1 y TIMP2, que bloquean el acceso de sustratos al dominio catalítico de la enzima. La MMP2 se regula principalmente a nivel de transcripción por varias citocinas y factores de crecimiento, incluyendo el TGF-β. La sobreexpresión de MMP2, que provoca desequilibrios entre MMP2 y TIMP1/2, se ha relacionado con la fibrosis tisular, el cáncer, la diabetes, la artritis y las enfermedades cardiovasculares. Por lo tanto, la secreción de este biomarcador es un criterio de valoración común que se mide en la investigación de estas enfermedades y en el desarrollo de nuevos fármacos.
Cómo funciona
Principio del ensayo
El ensayo de MMP2 humana de Cisbio se basa en un inmunoensayo sándwich TR-FRET con dos anticuerpos específicos anti-MMP2 humana: uno marcado con criptato de europio (Eu3+) (donante) y el otro con d2 (aceptor). Ambos anticuerpos se unen a la MMP2 humana, y la proximidad entre el donante y el aceptor permite una señal fluorescente TR-FRET. La intensidad de la señal es proporcional a la concentración de MMP2 humana presente en la muestra.

Protocolo de ensayo
El ensayo de MMP2 humana puede ejecutarse en una placa blanca de bajo volumen de 96 o 384 pocillos (20 µL final). Como se describe aquí, las muestras celulares o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección de MMP2 humana mediante reactivos HTRF®. Los anticuerpos marcados con fluoróforos HTRF pueden premezclarse y añadirse en un solo paso de dispensación. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido. El ensayo puede realizarse en muestras celulares congeladas o recién preparadas, y la señal HTRF puede registrarse con la mayoría de los lectores de placas multimodo TR-FRET. Aplicación: Cuantificación de proteínas.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica: Metabolismo cardiovascular, diabetes, esteatohepatitis no alcohólica (EHNA), fibrosis, oncología e inflamación.
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo