Revvity, 62MM9PEG, kit de detección de MMP9 humana HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo HTRF Human MMP9 está diseñado para medir las concentraciones de MMP-9 (formas proactiva y activa) en sobrenadantes de cultivos celulares de origen humano. La metaloproteinasa de matriz (MMP) 9, también conocida como gelatinasa B, es una endopeptidasa dependiente de zinc que se secreta como una proenzima inactiva y se activa posteriormente mediante escisión proteolítica. La MMP9 desempeña un papel fundamental en la reparación y remodelación tisular al degradar componentes estructurales de la matriz extracelular (MEC), como el colágeno, la gelatina y la elastina. Esta endopeptidasa también tiene funciones cruciales en el crecimiento celular, la migración, la inflamación y la angiogénesis mediante el procesamiento de una variedad de moléculas no ECM como citocinas y quimiocinas (p. ej., pro-TGF-β, pro-TNF-α, CXCL1, CXCL8, IFN-β). Su actividad enzimática está regulada por la interacción con sus inhibidores fisiológicos, los inhibidores tisulares de las metaloproteinasas TIMP1 y TIMP2, que bloquean el acceso de sustratos al dominio catalítico de la enzima. La MMP-9 está regulada principalmente a nivel de transcripción por varios factores de crecimiento, citocinas y productos bacterianos, incluyendo LPS. La regulación positiva de MMP9, que conduce a desequilibrios MMP9-TIMP1/2, se ha relacionado con la fibrosis tisular, el cáncer, la diabetes, la artritis y las enfermedades cardiovasculares. Por lo tanto, la secreción de este biomarcador es un punto final común medido cuando se investigan dichas enfermedades y para encontrar nuevos fármacos.
Cómo funciona
Principio del ensayo
El ensayo de MMP9 humana de Cisbio se basa en un inmunoensayo sándwich TR-FRET con dos anticuerpos específicos anti-MMP9 humana: uno marcado con criptato de europio (Eu3+) (donante) y el otro con d2 (aceptor). Ambos anticuerpos se unen a la MMP9 humana, y la proximidad entre el donante y el aceptor permite una señal fluorescente TR-FRET. La intensidad de la señal es proporcional a la concentración de MMP9 humana presente en la muestra.

Protocolo de ensayo
El ensayo de MMP9 humana de Cisbio puede ejecutarse en una placa blanca de bajo volumen de 96 o 384 pocillos (20 µL final). Como se describe aquí, las muestras celulares o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección de MMP9 humana mediante reactivos HTRF®. Los anticuerpos marcados con fluoróforos HTRF pueden premezclarse y añadirse en un solo paso de dispensación. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido. El ensayo puede realizarse en muestras celulares congeladas o recién preparadas, y la señal HTRF puede registrarse con la mayoría de los lectores de placas multimodo TR-FRET. Aplicación: Cuantificación de proteínas.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica: Metabolismo cardiovascular, diabetes, esteatohepatitis no alcohólica (EHNA), fibrosis, oncología e inflamación.
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo