Revvity, 62SAHPEH, kit de ensayo de metiltransferasa epigénica HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo de metiltransferasa epigénica es una solución universal para todas las metiltransferasas y sustratos (péptidos, nucleosomas, histonas completas, ADN, ARN, p53 y moléculas pequeñas). La detección se realiza mediante la medición de la conversión de s-adenosilhomocisteína (SAH) a partir de s-adenosilmetinionina (SAM) por metiltransferasas. El ensayo es compatible con la mayoría de las enzimas con una Km para SAM de entre 0,4 µM y 200 µM. El ensayo ofrece una alternativa única y robusta a la radiactividad.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del paso enzimático
El ensayo epigenético de metiltransferasa es un ensayo bioquímico universal para todas las enzimas de las familias de metiltransferasas de histonas (HMT) y ADN (DNMT) que producen S-adenosilhomocisteína (SAH). La actividad de la metiltransferasa se evalúa midiendo la conversión de SAM (S-5-adenosil-L-metionina) a SAH.

Principio de detección por pasos
Para medir directamente la liberación de SAH, se utiliza un anticuerpo anti-SAH marcado con criptato de Tb y un trazador SAH-d2. La SAH liberada por la reacción enzimática compite con la SAH-d2 marcada, lo que provoca una disminución de la señal HTRF.

Protocolo de ensayo
El sustrato se incuba con la enzima en presencia de compuestos. Se añade SAM (donante de CH₃) para iniciar la reacción enzimática que conduce a la metilación del sustrato. El anticuerpo específico para SAH, marcado con criptato de Tb, compite tanto con la SAH nativa como con la SAH acoplada a d₂. La señal TR-FRET resultante es inversamente proporcional a la concentración de SAH en el calibrador o en la muestra. Aplicación: Ensayo enzimático bioquímico.
Marca-EPIgeneous
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 120 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: epigenética
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica: Metabolismo/Diabetes, Neurociencia, Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo