Revvity, 62ST1PEC, kit HTRF KinEASE STK S1, 20 000 puntos de ensayo

Descripción general
La serie de kits HTRF KinEASE ofrece un enfoque bioquímico sencillo para estudiar la actividad de las quinasas, detectar inhibidores y caracterizarlos. Tres kits STK y uno TK ofrecen un método semiuniversal para evaluar la fosforilación en residuos de serina/treonina y tirosina, respectivamente. El ensayo HTRF KinEASE STK S1 ha sido validado con 56 quinasas de serina/treonina. La sección de validación de ensayos de esta página las enumera y ofrece consejos técnicos para su configuración. La serie de kits también incluye un kit Discovery para ayudar a determinar cuál de los tres kits STK es adecuado al trabajar con una enzima no validada.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo
Cada kit HTRF KinEASE se basa en el mismo formato de ensayo y utiliza un sustrato biotinilado universal, un anticuerpo monoclonal marcado con Eu-criptato fosfoespecífico y SA-XL665. Los tres sustratos peptídicos STK están compuestos por la misma secuencia para la detección de anticuerpos, junto a una secuencia variable reconocida por enzimas. El residuo diana para la fosforilación se encuentra entre ambas secuencias, la de actividad enzimática (no fosforilada) y la de detección de anticuerpos (fosforilada). Se ha demostrado que tres secuencias variables diferentes podrían permitir el estudio de la mayoría de las serina/treonina quinasas.

Protocolo de ensayo
Como se muestra aquí, todos los ensayos HTRF KinEASE funcionan de la misma manera e implican dos pasos:
Paso 1: Reacción de la quinasa. La quinasa se incuba en presencia o ausencia de compuestos y del sustrato adecuado. El tampón enzimático suplementado se añade al tampón de quinasa solo para quinasas tiroideas. Se añade ATP para iniciar la reacción.
Paso 2: Detección: Se añaden el criptato Eu3+ y los conjugados XL665. El tampón de detección contiene EDTA para detener la reacción enzimática. Aplicación: Ensayo enzimático bioquímico.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 10 µL
Condiciones de envío - Envío a temperatura ambiente
Clase objetivo: quinasas
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica: Metabolismo/Diabetes, EHNA/Fibrosis, Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 20.000 puntos de ensayo