Revvity, 62TDP43PEG, kit de agregación HTRF TDP-43, 500 puntos de ensayo

Descripción general
La proteína de unión a ADN TAR 43 (TDP-43) es una proteína de unión a ácidos nucleicos que participa en el metabolismo relacionado con el ARN. La TDP-43 agregada se ha identificado como un rasgo distintivo de la esclerosis lateral amiotrófica (ELA) y la demencia lobar frontotemporal (DLFT), y más ampliamente en varias enfermedades neurodegenerativas: proteinopatías TDP-43. En condiciones patológicas (mutación o desregulación), la TDP-43 forma cuerpos de inclusión insolubles en el citoplasma de las neuronas del cerebro y la médula espinal. El ensayo de agregación de TDP-43 detecta rápidamente agregados de TDP-43 en humanos y ratones en modelos celulares.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo de agregación de TDP-43
Los agregados de TDP-43 se miden comparando dos señales específicas de HTRF: la condición de control, donde solo se detecta TDP-43 soluble, y la condición desagregada, donde se evalúa el TDP-43 total desagregado y soluble. El aumento de la señal de HTRF desagregada refleja el nivel de agregación de TDP-43.

Paso de desagregación del TDP-43
Las muestras que contienen agregados de TDP-43 requieren un paso de desagregación para calcular el nivel de agregación de TDP-43 entre dos condiciones, antes y después del tratamiento de la muestra (la desagregación de la muestra puede seguir el protocolo descrito a la derecha). Los reactivos necesarios para este paso se incluyen en el kit para mayor comodidad. Las muestras se dispensan directamente en la placa de detección (blanca, de bajo volumen) para su detección con reactivos HTRF®.

Detección de agregación de TDP-43
La misma muestra de control, tratada o tras el paso de desagregación, se dispensa directamente en la placa de ensayo para su detección con reactivos HTRF® (placa blanca de bajo volumen de 384 pocillos o placa Revvity de bajo volumen de 96 pocillos en 20 µl). Los anticuerpos marcados con el donante y el aceptor HTRF se premezclan y se añaden en un solo paso de dispensación para agilizar aún más el procedimiento. El ensayo puede ejecutarse hasta un formato de 1536 pocillos simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido.

Análisis de datos del ensayo de agregación de TDP-43
La proporción agregada de cada muestra refleja la presencia de agregados de TDP-43 en una muestra.
En ausencia de agregados insolubles, la proporción de agregados es de aproximadamente 1 o inferior. Aplicación: Cuantificación de proteínas.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Biomarcadores de clase objetivo
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica-Neurociencia
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo